十堰进口血清
胎牛血清:胎牛血清初次解冻后,应按单次习惯用量分装,分装后的血清仍-20°C冻存。若置于4°C的血清,应在一周内用完。为保证细胞培养的较佳效果,血清和培养基的配置,应遵循“现用现配”原则。配好的培养液,应于一周内用完。血清避免反复冻融,避免在4°C或更高温度储存过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。胎牛血清是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。胎牛血清基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。十堰进口血清
如何挑选好的胎牛血清:好的胎牛血清是实验的成功的前提是所有实验人做细胞培养的共识,如何挑选好的胎牛血清,可以从以下几个方面着手。1.外观,好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明,血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。2、总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。3、血红蛋白,标准为不高于,20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。4、pH国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关。十堰进口血清有些情况下胎牛血清结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。
胎牛血清如何采取?在牛屠宰过程中,如发现母牛怀孕,就应立即将生殖系统从尸体中分离出来,在无菌条件下从子宫中取出小牛,进行脐带打结处理,清理羊水并消毒。在胎儿两肋之间直接插入一根针头到心脏,在真空的条件下,血液通过导管被抽入无菌的血液收集袋内。在没有真空泵时,也可将血液收集袋放在胎牛身体下面,通过重力作用或按摩方式进行收集。血液收集后,放在低温条件下凝集,经过离心去掉凝集物而获得血清。胎牛血清的获得量取决于胎儿的大小和年龄。胎儿至少3个月,否则会因心脏太小而不便于操作。一个3月龄的胎儿可产生150mL的血清;6月龄和9月龄的胎儿可分别产生350mL和550mL血清。
胎牛血清的意义:胎牛血清是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血,丰富的生长发育因子,胎牛血清非常适合各种细胞的培养,胎牛血清是细胞培养中重要的天然培养基,胎牛血清起到为细胞提供营养、支持、保护的作用。好的的胎牛血清是让细胞“快乐成长”的必备营养物,但劣质的胎牛血清,也可能会成为导致细胞死亡的“定时炸雷”。因此,挑选需要擦亮们的双眼。蛋白含量,总蛋白含量:胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,可能说明牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺入水或者其他溶剂。血红蛋白含量:标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。免疫球蛋白:免疫球蛋白的数值能侧面反映出时的牛龄情况,新生牛血清中容易检出IgM,IgG的含量也偏高,胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。胎牛血清提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物。
胎牛血清的生产工艺:胎牛血清适合脉冲示踪实验(同位素标记研究细胞代谢)适合转染CHO后的筛选,避免外源小分子对细胞产生干扰。透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的。胎牛血清在无菌条件下要经过0.1微米膜三重过滤,要进行一系列的检测,包括理化性质检查(如渗透压和pH值),成分检查(如内的毒性和血红蛋白)、外源因子检查(如细菌、病毒和支原体)以及促进细胞增殖的检查等。透析胎牛血清为保证其性能和安全性,也需具备胎牛血清的这些工艺和检查。血纤维蛋白在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中。上海不含外泌体血清厂家
胎牛血清加热可以灭活补体系统。十堰进口血清
如何挑选适合细胞生长的胎牛血清?原代或是正常细胞株建议使用BI特级胎牛血清,对生长条件要求高的细胞和干细胞可选用特级胎牛血清,或胚胎干细胞胎牛血清。由于血清有批间差异,细胞种类不同,我们建议客户购买前可先申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求可进行批量囤货,以保证该项目所需血清质量的一致性,可排除不同批号血清对于实验带来的影响。如何正确保存胎牛血清?需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。十堰进口血清
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