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胎牛血清的主要成分:蛋白质类包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)等;多肽类,主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,较为主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用;类,对细胞的作用是多方面的。包括:胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用:促生长:促进细胞增殖的效应;氢化可的松:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清中 的氢化可的松,在细胞密度较高时可能有抑制细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。绍兴进口血清哪里有
热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。金华优级胎牛血清哪里有血清的主要作用是提供基本营养物质、提供和各种生长因子、提供结合蛋白。
因为制作工艺成熟和产量大的原因,实验室常备血清一般都为牛血清。而牛血清种类也因适合培养不同种类的细胞分很多种了,同属于牛血清为什么它们价格却有天壤之别。我们就拿市面上应用较为广的胎牛血清和新生牛血清为例。除了生产成本和供应来源不一样外,两种血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可较为大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉。和新生牛血清相比,胎牛血清显然产量低,成本高。二者的成分也很不一样。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,还含有丰富的胚胎生长促进因子以及各种还未完全鉴定的成分,可满足所培养细胞的特殊的代谢需求。
多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下,其促进的比率也是微不足道的。另外,血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染,从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。所以胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
很好的胎牛血清:好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。国产血清,大多高于ph7.5,进口胎牛血清,大多低于ph7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。绍兴进口血清哪里有
血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成。绍兴进口血清哪里有
合格的胎牛血清都需要经过严格的多重质检和验证,这里需要特别关注胎牛血清的相关质量合格证明,不但不能含有有害微生物,如细菌、菌类、支原体、病毒等,同时也必须通过了各种性能测试实验。通过验证细胞的形态、增殖速度、克隆形成率等多项测试,性能表现优异的胎牛血清对细胞培养更友好,效果更明显。胎牛血清作为畜牧业的副产品,产量十分有限,且受到天然环境、食物卫生、经济条件及等各种因素的影响,很好的胎牛血清就更加稀有。因此,找到稳定提供同批次胎牛血清的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,还能大量节省试错(经济)成本。绍兴进口血清哪里有
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