上海市单细胞测序高通量测序产品

时间:2022年10月12日 来源:

真核/原核无参mRNA-Seq,项目介绍;测序使用Illumina Xten平台,测序原始数据质控后进行拼接,并进一步对拼接所得转录本进行功能注释、CDD、CDS分析,SNP分析,SSR标记开发等分析。在计算基因的表达量后,进行基因表达差异及差异基因GO、KOG(原核生物为COG)、KEGG功能富集分析,KEGG pathway等分析。对于多个样本,可进行重复相关性检查、共表达分析、PCA主成分分析。另外,还可以进行基因功能互作、蛋白网络互作等分析,深入研究基因功能,进一步揭示基因间互作网络等信息,为研究网络调控机理提供方向。 截止目前为止,生工生物可是为数不多的同时拥有ChromiumController和ChromiumX平台的公司。上海市单细胞测序高通量测序产品

IlluminaHiSeq2500/4000可以运行PE150/PE250模式,可以承担转录组测序、人基因组重测序、外显子捕获测序、宏基因组测序、微生物分类测序等服务;IlluminaMiSeq运行PE300模式,可以承担细菌基因组重测序/Denovo测序、微生物分类测序、扩增子测序、核酸适配体测序等服务;LifeIontorrentPGM运行314、316、318芯片,可以承接扩增子测序、靶区域测序、基因组重测序服务;PacBioSequel/RSII该测序平台读长超长,平均可达10kb以上,主要承接细菌基因组完成图测序、***基因组精细图测序、全长转录本测序等服务;上海生工生物 高通量测序技术请提供电泳胶图,浓度>20 ng/μl,总量一般1~2 μg。乙醇沉淀DNA或冻干DNA,可冰袋运输,不超过3天。

AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)是一种小分子染料,可以通过完整的细胞膜,嵌入所有细胞(活细胞和死细胞)的细胞核,呈现绿色荧光;碘化丙啶(PI)只能通过不完整的细胞膜,即死细胞的细胞膜,嵌入所有死细胞的细胞核,呈现红色荧光,通过标记出的绿色荧光和红色荧光就可以辨别出活细胞和死细胞,这种特异性染色的方法也可以排除无核细胞、杂质、碎片等的干扰。荧光细胞计数仪检测结果可以让我们直观的看到:细胞浓度(总细胞,活细胞,死细胞)、细胞存活率(台盼蓝和双荧光AO/PI染色)、细胞平均直径、细胞聚团率、细胞直径分布等结果的展示。

扩增子测序,项目介绍:随着基因编辑技术(尤其是CRISPR-cas9技术)的发展,科研人员使用传统的Sanger测序技术无法快速有效鉴定基因编辑效率。但是,通过对靶基因区域附近设计引物,进行PCR扩增,并对PCR产物进行高通量测序,可以快速高效的获得目标区域的突变频率信息,尤其是对低频突变的检测效果远远优于一代测序,性价比极高。16S全长分类测序,项目介绍:16S全长测序分析主要是对 16S rRNA基因全长进行扩增,基于PacBio 测序平台测序. 相比较二代测序只选择 1-2 个高变区进行测序,三代可以获得全长的 16S 序列,更多变异区信息可以提高物种鉴定的分辨率,还可以提高对于群落组成的鉴定的精度。另外,针对fungus/真核生物,也可以采用类似的办法,扩增ITS/18S全长,进行物种分类测序,提高鉴定精度。Life Ion torrentPGM 运行314、316、318芯片,可以承接扩增子测序、靶区域测序、基因组重测序服务。

使用显微镜进行悬液质检操作时应注意:1.使用血球计数板时,可以提前镜检观察每小格计数室内是否洁净无杂质。若有杂质灰层,则需要多次清洗,直至计数室洁净无瑕;2.质检前将悬液轻微震荡或使用扩口gun头吹打混匀;3.台盼蓝染色后需要尽快完成细胞计数,一般建议不要超过10分钟;4.如果方格中细胞数目过多,难以数清,应当对细胞悬液进行稀释以便于计数;5.对于压在方格界线上的细胞应当计数同侧相邻两边上的细胞数,一般可采取“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则处理,另两边不计数。如果问现在什么技术是测序届的宠儿,那么单细胞测序则是我们不得不提及的技术了。上海地区宏基因组高通量测序高通量

生工高通量测序部拥有丰富的样品处理经验,日均处理样品200余例。上海市单细胞测序高通量测序产品

细胞质检时染料染色的原理:台盼蓝染色原理:台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不被染色。而死细胞的细胞膜透性增高,可使染料进入细胞内而使死细胞染成淡蓝色。AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)是一种小分子染料,可以通过完整的细胞膜,嵌入所有细胞(活细胞和死细胞)的细胞核,呈现绿色荧光;碘化丙啶(PI)只能通过不完整的细胞膜,即死细胞的细胞膜,嵌入所有死细胞的细胞核,呈现红色荧光,通过标记出的绿色荧光和红色荧光就可以辨别出活细胞和死细胞,这种特异性染色的方法也可以排除无核细胞、杂质、碎片等的干扰。上海市单细胞测序高通量测序产品

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