神经细胞转染试剂配制

时间:2023年04月06日 来源:

细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体,以慢***、腺***和腺相关***等**常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感电转化化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法,主要包括两类:阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。正确的了解您希望输送的运载物是选择可靠转染产品的第一步。神经细胞转染试剂配制

用LipoD293™体外DNA转染试剂(Ver.II)(上图)和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™(下图)转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后,细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图(左侧)和荧光成像图(右侧)。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达,用量为LipoD293™试剂,20微克,所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。上海动物体内转染试剂公司siRNA脱靶效应会导致细胞死亡,并引起分析问题。

用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFPcDNA,右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性.

美国Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精细化学试剂、实验室产品,单/多聚体等产品的研发供应,所提供的产品服务于组织学(显微技术)、生物技术、电子技术、护理及制药工程等多个领域。起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。与****合作,开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家**中心合作,开发天然产物分离和纯化产品,并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠,用于DNA、蛋白质和肽的研究。一般会同时设置对照,对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA,达到比较大预期反应。

对HepG2细胞转染效率的比较右图:使用以上转染试剂将GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生产商的提供的转染步骤转染到HepG2细胞(在胶原预处理的培养皿中培养)。在转染48小时之后,用流式细胞仪检测GFP阳性细胞(%)和荧光强度。左图:血清和***存在的条件下能提高LipoD293试剂(升级版)对在HepG2细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染HepG2细胞(生长在胶原处理的培养皿上)---无血清和***,10%血清和***的存在,转染5小时后换液和不换液。原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖.sirna转染试剂推荐

转染的细胞类型可简单分为两大类,连续细胞系和原代细胞.神经细胞转染试剂配制

简介:X-tremeGENEHPDNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂,兼容含血清或不含血清的培养基,可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势:1.简单易用的多组分混合试剂,无动物源性成分,室温稳定。2.高转染效率,对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。3.使用细胞毒性低的试剂,结果相关性好.图2.X-tremeGENEHP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENEHP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENEHP,导致存活细胞量减少(图片来源于网络).神经细胞转染试剂配制

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