原代细胞转染试剂原理

时间:2023年04月16日 来源:

在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较图片由芝加哥大学肺和重症护理系的NickolaiDulin博士友情提供制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用LipoD293™试剂(左图)和Lipofecatmine2000(L2K,右图)分别将GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染24小时后,用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。对难转染细胞LNCap细胞转染效率的比较在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较图片由罗斯威尔公园**研究所(RoswellCancerInstitute)mRNA细胞&***转染试剂来助力.原代细胞转染试剂原理

确定希望输送的运载物(如DNA、RNA或蛋白质)根据不同实验类型,我们可能需要将不同的运载物输送到细胞内部,包括**常见的DNA,用于基因编辑的siRNA,能够更快表达蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是体内转染。正确的了解您希望输送的运载物是选择可靠转染产品的第一步。2希望转染的细胞类型转染的细胞类型可简单分为两大类,连续细胞系和原代细胞。连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。但由于此类细胞经历过基因改变而变得具有无限增殖能力,它们在培养过程中的表现可能无法必然地反映体内状态。阳离子聚合物转染试剂原理所见即所得——分享两款超好用的转染试剂,拯救你的细胞.

LNCap细胞的培养和传代严格由ATCC建议的操作步骤进行,与pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共转染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293™试剂(左图)和FugeneHD(右图)分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染24小时后,用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2细胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分别转染达到95%的细胞融合。转染48小时后,分别通过Zeiss510激光共聚焦显微镜和β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。

图3.用于转染的Invivofectamine3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。高效、靶向敲低在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果图4.使用Invivofectamine3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine3.0试剂与靶向FactorVII(FVII)或PPIBmRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。用了这个转染试剂,慢***再也不用怕转不进去了!

转染产品知多少:转染试剂选择工具收录于话题转染是将核酸导入真核细胞中的过程,是细胞生物学、基因表达和基因***实验中的关键步骤。不同的实验方案和技术差别巨大,我们可以利用化学方法或脂质体将核酸(DNA或RNA)高效输送到细胞内,也可以使用电穿孔方法利用电流在细胞膜上开孔,使核酸进入细胞内。赛默飞提供了多种高质量的转染产品,适用于各种细胞类型的转染。如何选择**受信赖的可用于转染的系统,是实验结果的重要影响因素。转染试剂--总有一款你想要的.腺病毒转染试剂价格

采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。原代细胞转染试剂原理

图7.对注射了Invivofectamine3.0试剂的小鼠样品进行血液化学分析。将Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的复合物分别以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未处理[U]的剂量注射入小鼠体内。在注射后2、24及48小时收集血液样品,并通过临床化学检测方法对数个生物标志物(Antech)进行评估。结果表明在使用Invivofectamine3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。除了以上两种于siRNA的转染试剂,还有通用型转染试剂Lipofectamine™2000,Lipofectamine™3000和Neon™转染系统也可以用于siRNA转染原代细胞转染试剂原理

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