江苏cck8 生长曲线

摸条件包括1、种板数；2、种板后细胞的贴壁生长时间；3、加药后的孵育时间；4、cck8试剂加入量；5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多，其实这就是一个实验。而且都是种的空白板，也就是不加药物，只加细胞和CCK8。我没有做过MTT实验，但其实原理及目的都是一样的（反应机理不一样）。都说CCK8简单点而且数据更稳定，所以就用了这个试剂盒。

当然仁者见仁智者见智，我写的只是个人实验心得，但供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的，道路是曲折的，时间就是用来浪费的，科研就是自娱自乐使劲折腾。

加入CCK8那会空白对照组的细胞刚好长满吗？江苏cck8 生长曲线

、***浓度的确定需要做一个时间梯度，铺板和上述相同，只需把各个实验组改成各个作用时间就可以了。至于说***浓度的确定，网上有很多确认方法，个人建议以IC50值作为***浓度即可。计算方法，某园子里都有，就不在这里介绍了。

MTT作用之后，一定要小心吸走培养液，以免将孔内的紫色结晶吸走。有条件的实验室，这一步可以采用离心机将沉淀充分离心到孔底，防止被吸出。如果没有这种类型的离心机，可以在测量吸光度的时候，将酶联免疫的机器震荡时间调制5分钟，**起码可以保证沉淀充分溶解。 天津mtt与cck8的波长CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8，也就是进行细胞计数的一个盒子。

CCK-8的用途1.细胞增殖测定：细胞增殖实验在很多领域都会用到，比如**相关、损伤后修复等。2.***筛选：在测定一个***的毒性和安全有效浓度时，经常会用到CCK-8。3.细胞毒性测定：这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响，比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。4.**药敏试验：这个是用的比较广的，我见过做**的团队，买CCK-8都是一整箱，一整箱的买，比如果子老师所在的团队，哈哈哈。5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验

一直都像个新手，从未老道过。所有新手的迷茫与无奈我**能体会。看到园子里有一些同学在问有关CCK8试验的事情，当初我也和他们一样，像个被蜘蛛丝缠住头的迷茫苍蝇一头扎进园子里，期待能找到些解决谜团的只言片语。希望我写的这些非专业文字能够帮助那些在实验室里没有前行者指点迷津的筒子们。当然仁者见仁智者见智，我写的只是个人实验心得，就供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的，道路是曲折的，时间就是用来浪费的，科研就是自娱自乐使劲折腾。在电子耦合试剂（也就是细胞是活的，有呼吸，有能量代谢）.

培养基对CCK8测定的影响：不同的培养基中含有氧化还原性物质不同，（主要是氨基酸的成分及糖含量），会与CCK8发生反应，产生实验误差，因此所用培养基要一致，不要更换其他培养基。比如DMEM空白吸收为0.93；1640培养基在0.5左右。另外培养基中有酚红存在的情况下，会增加空白吸收，但不影响测定，扣除空白吸收即可，可见空白孔非常重要，所以每次实验均要设定空白对照。另外，血清不影响测定。有师妹在做一个HIF1a***剂实验时，多加了这个***剂的浓度，细胞毒性测定：这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响，比如低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。上海mtt与cck8的波长

CCK8检测细胞增殖和毒性实验.江苏cck8 生长曲线

实验材料及试剂

96 孔板、CO2培养箱、酒精灯、移液***、酶标仪等；细胞、CCK8等。

实验内容取生长状态良好的对数生长期细胞，每孔按 4×103个接种至 96 孔板中，每组设置8个复孔，置于细胞培养箱中培养，待细胞贴壁后转染相应质粒后。继续培养 48h 后，弃含药培养基，每孔加入新鲜配制的含 10ｕL的毒性检测液CCK8，置于培养箱中继续培养 4h 后，用酶标仪测波长为450 nm的OD值。实验重复 3 次， 取实验结果的平均值作为**终实验结果。按公式计算生长***率＝[(对照组 OD－实验组 OD)/对照组 OD]  ×**，以分组为横坐标，生长***率为纵坐标，绘制细胞生长***率柱状图。 江苏cck8 生长曲线