上海常用转染试剂类型

十全十美难，十全九美却可以通过选择一款好的转染试剂来实现。理想的转染试剂包括要具有较高的转染效率，细胞毒性低，操作简单可重复，价格还要可爱。现在大多数实验室用的是脂质体系列转染试剂，但脂质体对细胞毒性大，某些细胞的转染效率还很低，看单孔的价格也很不美好。尤其是在转染RNA方面，脂质体的劣势较明显。QIAGEN在转染试剂领域的研发思路与其核酸纯化领域的精而专，全而深不同。在转染试剂的研发过程中，另辟蹊径，研精致思进而做到小而美的转染产品。从市面上众多转染试剂的一片红海中，神奇的开辟出一块蓝海，为客户烹制出了几款高效、快速、低毒又亲民的转染试剂私房菜。每孔培养体积均为100μL，细胞数目在105左右。上海常用转染试剂类型

基于磷酸钙成分的转染试剂，其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物，粘附到细胞膜表面，借助内吞作用进入细胞质。pH值，钙离子浓度，DNA浓度，沉淀时间，细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响，因此实验条件摸索和优化时间较长，且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。此方法操作简单，重复性好，在体外转染中有很高的效率，但具有一定的细胞毒性，可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响，需要去除血清。罗氏转染试剂类型细胞培养系列 | 专为 293T 优化的转染试剂 Nano293T.

在难转染细胞（原代大鼠动脉平滑肌细胞）转染效率的比较

图片由芝加哥大学肺和重症护理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用 LipoD293™试剂（左图）和 Lipofecatmine 2000（L2K, 右图）分别将 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染 24 小时后，用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光，以此来评价转染效率。

对难转染细胞 LNCap 细胞转染效率的比较

在难转染细胞（原代大鼠动脉平滑肌细胞）转染效率的比较

图片由罗斯威尔公园**研究所（Roswell Cancer Institute）

转染产品知多少：转染试剂选择工具收录于话题转染是将核酸导入真核细胞中的过程，是细胞生物学、基因表达和基因***实验中的关键步骤。不同的实验方案和技术差别巨大，我们可以利用化学方法或脂质体将核酸(DNA或RNA)高效输送到细胞内，也可以使用电穿孔方法利用电流在细胞膜上开孔，使核酸进入细胞内。赛默飞提供了多种高质量的转染产品，适用于各种细胞类型的转染。如何选择**受信赖的可用于转染的系统，是实验结果的重要影响因素。将EntransterTM-R4000稀释液和agomir稀释液充分混合.

产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂（升级版）和 Lipofectamine LTX（LTX）试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞，其次是分别添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上图）和 10 微升（下图）。

5 天后，细胞通过流式细胞仪检测。右上角的数字表明转导的细胞的百分比来测定慢***的滴度。由 LipoD293™ and LTX 产生的慢***的滴度被量化，分为是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 赛默飞提供了多种高质量的转染产品，适用于各种细胞类型的转染。上海常用转染试剂类型

MagTransf 磁转染试剂实现高效转染解析.上海常用转染试剂类型

图7.对注射了Invivofectamine3.0试剂的小鼠样品进行血液化学分析。将Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的复合物分别以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未处理[U]的剂量注射入小鼠体内。在注射后2、24及48小时收集血液样品，并通过临床化学检测方法对数个生物标志物(Antech)进行评估。结果表明在使用Invivofectamine3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。除了以上两种于siRNA的转染试剂，还有通用型转染试剂Lipofectamine™2000，Lipofectamine™3000和Neon™转染系统也可以用于siRNA转染上海常用转染试剂类型