悬浮细胞转染试剂作用

转染产品知多少：转染试剂选择工具收录于话题转染是将核酸导入真核细胞中的过程，是细胞生物学、基因表达和基因***实验中的关键步骤。不同的实验方案和技术差别巨大，我们可以利用化学方法或脂质体将核酸(DNA或RNA)高效输送到细胞内，也可以使用电穿孔方法利用电流在细胞膜上开孔，使核酸进入细胞内。赛默飞提供了多种高质量的转染产品，适用于各种细胞类型的转染。如何选择**受信赖的可用于转染的系统，是实验结果的重要影响因素。细胞转染必备——高效低毒转染试剂.悬浮细胞转染试剂作用

用LipoD293™体外DNA转染试剂（Ver.II）（上图）和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™（下图）转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后，细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达，用量为LipoD293™试剂，20微克，所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。体内转染试剂对照siRNA脱靶效应会导致细胞死亡，并引起分析问题。

产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂（升级版）和 Lipofectamine LTX（LTX）试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞，其次是分别添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上图）和 10 微升（下图）。

5 天后，细胞通过流式细胞仪检测。右上角的数字表明转导的细胞的百分比来测定慢***的滴度。由 LipoD293™ and LTX 产生的慢***的滴度被量化，分为是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。

图2.采用LipofectamineRNAiMAX转染试剂转染A549细胞时，实现了比较好的基因***效果和比较低的细胞毒性。试验采用的LipofectamineRNAiMAX试剂剂量范围为0.1μL-1.0μL之间，在维持优良的细胞活力的同时，实现了p53基因表达水平的有效敲低.功能多样简便的实验方案，易于针对***的细胞系进行优化Invivofectamine™3.0Reagent突破性的体内转染试剂Invivofectamine3.0试剂是一种突破性的体内RNAi输送试剂，可大幅改善实验性能，使用微克级的siRNA即可达到高达85%的敲低效果。惊艳登场!临床级载体生产必备转染试剂。

超级好用的siRNA和miRNA转染试剂——HiPerFect高效沉默低脱靶：HiPerFect是小RNA转染试剂，这种非脂质体的脂质分子可以在siRNA低至100pM浓度的条件下转染（推荐浓度是1nM-5nM）。保持高效基因沉默的同时降低脱靶效应，正是这一产品的精髓所在。除了siRNA，HiPerFect还能够用于miRNA模拟物和***剂的转染，满足miRNA功能分析的需要。操作简单，方便快速：HiperFect转染试剂的方便程度也是***的，甚至***之内可以完成再次接种、转染到检测结果！这对于高通量反应简直是求之不得的福音：转染前将细胞按比例接种到24孔培养皿中，培养基可以是含有***和血清的，在37度培养箱中保温。连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理.转染试剂原理

赛默飞提供了多种高质量的转染产品，适用于各种细胞类型的转染。悬浮细胞转染试剂作用

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证。悬浮细胞转染试剂作用