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.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。

高灵活应用， 同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。

细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。

兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。

X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nM HPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。 并更换培养基，继续培养24 h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。上海转染试剂购买

LNCap细胞的培养和传代严格由ATCC建议的操作步骤进行，与pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共转染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293™试剂（左图）和FugeneHD（右图）分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染24小时后，用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光，以此来评价转染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2细胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分别转染达到95%的细胞融合。转染48小时后，分别通过Zeiss510激光共聚焦显微镜和β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。上海非脂质体转染试剂盒连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理.

用LipoFectMax™转染Hela细胞，左图转染GFPcDNA，右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白（GFP），转染24小时后观察转染效果，LipoFectMax™转染效率（左图）比LipoFectamine®2000（右图）高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作，通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性.

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！

载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP 载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证. 用于siRNA的转染试剂，还有通用型转染试剂Lipofectamine™.

细胞转染过程:X-tremeGENE9DNA转染试剂简介：X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。优势：1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力惊艳登场!临床级载体生产必备转染试剂。DNA转染试剂供应商

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原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖。因此，它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系，它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命（即它们是有限细胞系），且随着传代的进行，具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位，从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说，这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便，尤其是稳定转染的克隆传代。 上海转染试剂购买