上海非脂质体转染试剂推荐

时间:2022年04月15日 来源:

基于阳离子聚合物的转染试剂,带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用,并通过内吞作用进入细胞。其又分为树枝状阳离子聚合物和线性阳离子聚合物两类,前者细胞毒性相对较大,后者细胞毒性较小,但其转染效率都高于脂质体转染,适用也较为广范。以上单一成分的转染试剂或聚焦于提高效率或着重于降低细胞毒性,可谓鱼和熊掌不可兼得也。新一代转染试剂,不局限于单一成分,混合了不同配方的脂类(非脂质体)、加上蛋白质组分、以及各种的成分,兼具了转染效率高和细胞毒性小的优势,且操作更加简单,易于高通量。转染产品知多少:转染试剂选择工具.上海非脂质体转染试剂推荐

产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂(升级版)和 Lipofectamine LTX(LTX)试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上图)和 10 微升(下图)。

5 天后,细胞通过流式细胞仪检测。右上角的数字表明转导的细胞的百分比来测定慢***的滴度。由 LipoD293™ and LTX 产生的慢***的滴度被量化,分为是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 上海非脂质体转染试剂推荐mRNA细胞&***转染试剂来助力.

对 HepG2 细胞转染效率的比较

右图:使用以上转染试剂将 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生产商的提供的转染步骤转染到 HepG2 细胞(在胶原预处理的培养皿中培养)。在转染 48 小时之后,用流式细胞仪检测 GFP 阳性细胞(%)和荧光强度。

左图:血清和***存在的条件下能提高 LipoD293 试剂(升级版)对在 HepG2 细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染 HepG2 细胞(生长在胶原处理的培养皿上)---无血清和***,10% 血清和***的存在,转染 5 小时后换液和不换液。

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖,因此,它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系,它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后,原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命(即它们是有限细胞系),且随着传代的进行,具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位,从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说,这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便,尤其是稳定转染的克隆传代。连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。

图3. 用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。



高效、靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果



图4. 使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。 随后分离血清并检测FVII蛋白的水平(Biophen 显色检测)。上海DNA转染试剂多少钱

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简介:X-tremeGENE HP DNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂,兼容含血清或不含血清的培养基,可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势:

1.简单易用的多组分混合试剂,无动物源性成分,室温稳定。

2.高转染效率,对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。

3.使用细胞毒性低的试剂,结果相关性好。

图2. X-tremeGENE HP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENE HP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENE HP,导致存活细胞量减少(图片来源于网络)。 上海非脂质体转染试剂推荐

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