上海非脂质体转染试剂购买

时间:2022年04月27日 来源:

转染 48 小时后,使用尼康荧光显微镜 GFP 荧光进行成像(左侧四幅图),A:LipoD293; B:293fectin;C:Xfect 和 D:Fugene 6.  带有 6xHis 标记的 GFP 荧光蛋白使用 Ni-NTA 亲和柱技术实现分离。5 微升洗脱液载入 SDS-PAGE 凝胶电泳分离并进行 Coomassie 亮蓝染色(右上图 E),道 1 为 LipoD293293、道 2 为标准蛋白分子、道 3 为 Xfect、道 4 为 293fectin 和道 5 为 Fugene 6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量(见右下图 F)。产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂(升级版)和 Lipofectamine LTX(LTX)试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上图)和 10 微升(下图)。 转染试剂快速查找工具上线!上海非脂质体转染试剂购买

用LipoD293™体外DNA转染试剂(Ver.II)(上图)和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™(下图)转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后,细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图(左侧)和荧光成像图(右侧)。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达,用量为LipoD293™试剂,20微克,所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。上海细胞转染试剂公司转染试剂实现了更高的有效***细胞/未转染细胞比率,超过其他RNAi试剂。

在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用,同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。

在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较

图片由芝加哥大学肺和重症护理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用 LipoD293™试剂(左图)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右图)分别将 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染 24 小时后,用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光,以此来评价转染效率。

对难转染细胞 LNCap 细胞转染效率的比较

图片由罗斯威尔公园**研究所(Roswell Cancer Institute)的 Lyn Gao 博士友情提供



转染后6h观察细胞状态,并更换培养基,继续培养24 h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体,以慢***、腺***和腺相关***等**常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感电转化化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法,主要包括两类:阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。riboFECT CP转染试剂应用案例,可转染各种细胞,靠谱!roche转染试剂配制

谁来拯救我的细胞之QIAGEN转染试剂.上海非脂质体转染试剂购买

LipoFectMax™转染试剂 LipoFectMax™转染试剂具有以下几个优点:高转染效率,适用于多种细胞系对细胞毒性低适用于DNA和RNA的转染转染前无需去除细胞培养基或血清转染后无需清洗细胞或更换培养基

1转染效率高,适用于多种细胞系图1. LipoFectMax™转染试剂以绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒转染几种常见细胞系,通过检测GFP信号比较转染效率。

2细胞毒性低图2.LipoFectMax™ ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。 上海非脂质体转染试剂购买

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