上海真核细胞转染试剂作用

时间:2022年11月09日 来源:

确定希望输送的运载物(如DNA、RNA或蛋白质)根据不同实验类型,我们可能需要将不同的运载物输送到细胞内部,包括**常见的DNA,用于基因编辑的siRNA,能够更快表达蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是体内转染。正确的了解您希望输送的运载物是选择可靠转染产品的第一步。2希望转染的细胞类型转染的细胞类型可简单分为两大类,连续细胞系和原代细胞。连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。但由于此类细胞经历过基因改变而变得具有无限增殖能力,它们在培养过程中的表现可能无法必然地反映体内状态。每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。上海真核细胞转染试剂作用

转染48小时后,使用尼康荧光显微镜GFP荧光进行成像(左侧四幅图),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.带有6xHis标记的GFP荧光蛋白使用Ni-NTA亲和柱技术实现分离。5微升洗脱液载入SDS-PAGE凝胶电泳分离并进行Coomassie亮蓝染色(右上图E),道1为LipoD293293、道2为标准蛋白分子、道3为Xfect、道4为293fectin和道5为Fugene6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量(见右下图F)。产生慢***的比较通过LipoD293™试剂(升级版)和LipofectamineLTX(LTX)试剂将三个cDNAs共转染进293T细胞。一个GFP载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用来测定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1微升(上图)和10微升(下图)。上海转染试剂价格在经过***次传代培养之后,原代培养物变成了一种细胞系。

罗氏X-TremeGENE便是新一代转染试剂的佼佼者,升级版的多组分混合试剂,兼具极高转染效率和极低细胞毒性,在超过350株真核细胞株中获得了高效转染的验证,尤其针对难转染细胞株亦有出色表现。图1.两种试剂对CHO-K1细胞转染带GFP标记的质粒,A和C是转染后荧光显微图,B和D是明场显微图.与竞争产品比较,X-tremeGENEHP表现出更优的转染效率更低的细胞毒性图2.不同试剂在含血清的培养基中对四种很难转染的细胞株进行转染,X-tremeGENEHP试剂远优于其他试剂超过350种细胞株的高效转染验证还有一个好消息X-TremeGENE转染试剂正在进行8折促销哦快去抢购吧~

超级好用的siRNA和miRNA转染试剂——HiPerFect高效沉默低脱靶:HiPerFect是小RNA转染试剂,这种非脂质体的脂质分子可以在siRNA低至100pM浓度的条件下转染(推荐浓度是1nM-5nM)。保持高效基因沉默的同时降低脱靶效应,正是这一产品的精髓所在。除了siRNA,HiPerFect还能够用于miRNA模拟物和***剂的转染,满足miRNA功能分析的需要。操作简单,方便快速:HiperFect转染试剂的方便程度也是***的,甚至***之内可以完成再次接种、转染到检测结果!这对于高通量反应简直是求之不得的福音:转染前将细胞按比例接种到24孔培养皿中,培养基可以是含有***和血清的,在37度培养箱中保温。连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理.

图5.Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的siRNA在单次静脉注射后可在肝脏中引起剂量反应的敲低现象。Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的剂量进行注射。随后分离血清并检测FVII蛋白的水平(Biophen显色检测)。持续敲低能力在单次注射后可观察到更长的敲低时间图6.使用三种不同浓度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究剂量效应。siRNA分子与Invivofectamine3.0试剂形成复合物后分别以1、0.5、及0.25mg/kg的剂量进行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清,并使用显色法对血清进行分析以确定FVII蛋白的敲低效果。低毒性惊艳登场!临床级载体生产必备转染试剂。上海腺病毒转染试剂

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在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较图片由芝加哥大学肺和重症护理系的NickolaiDulin博士友情提供制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用LipoD293™试剂(左图)和Lipofecatmine2000(L2K,右图)分别将GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染24小时后,用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光,以此来评价转染效率。对难转染细胞LNCap细胞转染效率的比较在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较图片由罗斯威尔公园**研究所(RoswellCancerInstitute)上海真核细胞转染试剂作用

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