云南细胞划痕第三方检测中心

时间:2023年02月23日 来源:

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如何开展qpcr第三方检测方法的分析验证?在检测大量样品前,每对引物都需要用对照样品进行梯度稀释实验,以验证方法和数据的可靠性。如果是评估商业化试剂,则比较好使用内参基因和高、中、低丰度的目标基因来做梯度稀释实验,这样可以更地了解检测方法的分析性能。同一个基因RNA在不同样品间表达水平可能有高有低,无论表达量高低,反转录效率一致的qPCR结果才能真正反映RNA水平:将 cDNA 或者 DNA 进行 4~10 倍梯度稀释,得到至少 5 个浓度梯度的 cDNA(cDNA1,cDNA2,cDNA3,cDNA4,cDNA5),分别使用 qPCR supermix A,qPCR supermix B 针对同样的模板进行检测。

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