多色免疫组化检测服务

时间:2022年12月15日 来源:

Luminex——液相芯片检测实验技术服务特点:1、既能检测蛋白,又能检测核酸。2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域。3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标。Luminex——液相芯片检测实验技术服务适宜领域:1、临床:肿块物标记物检测-流式荧光免疫法HPV的检测-流式荧光杂交法2、疾控系统:流行病监测等3、血站系统:HLA分型检测4、自身免疫诊断相关检测、心血管疾病相关因子检测、糖尿病指标检测,骨代谢检测、内分泌检测等微球免疫分析系统CBA是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法。多色免疫组化检测服务

LabEx提供抗体芯片技术服务,您只需提供保存完好的标本(组织、细胞培养上清、血清、血浆),本公司的芯片技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析,向您提供由您所选的任何一种芯片的实验结果,可以为您节省大量的时间与精力。蛋白芯片技术特点:作为一种快速、灵敏而又经济的工具,蛋白芯片能同时检测单个样品中多种分析物的相对水平。蛋白芯片的使用不需要任何特殊的仪器,也取代了多次免疫沉淀/Westernblot实验。每个芯片在设计时都利用了精心挑选的捕获抗体,它们在硝酸纤维素膜上重复点样两次。经多项研究证实,蛋白芯片能简化鉴定蛋白所需的筛选过程。蛋白芯片高通量定性分析试剂盒比WB的灵敏度高100倍;更有大规模多分子高通量筛选作用,通过监控蛋白水平和一些蛋白翻译后修饰的变化,能迅速靶定目标分子,以便进一步的研究。luminex多因子价格LabEx细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别对各种产生积极反应的细胞因子的独特组合。

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。

Q:样本处理方案?A:血清:不含抗凝剂的**管**,室温静置2小时(避免震动,防止溶血),离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存血浆:含抗凝剂(EDTA、肝素,具体采取哪种抗凝剂,参考说明书)的**管**,,离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存细胞裂解液:收集细胞,PBS清洗后,离心10min(1000g,4℃),弃去上清,加入适量裂解液(107细胞对应200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存组织裂解液:适量RIPA裂解液加入组织中(10mg对应100-200ul裂解液),组织破碎器处理组织至匀浆(冰上处理),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存细胞上清:离心,取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小。

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测?A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。Q:为什么要做预实验?A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗?A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率测定。多因子elisa检测

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液态流式技术(Luminex)特点:多重检测:理论上可同时检测100种生物靶标。节省样品:只需低至25μl的样品体积。高灵敏度:精确定量下限低至0.1pg/mL。应用范围应用领域:免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。分析物类型:细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。其他应用:信号通路、重大疾病相关、Biomarker开发、临床应用。多色免疫组化检测服务

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