抗体芯片检测原理

时间:2022年12月19日 来源:

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。本panel可检测以下因子:PDGF-AB,TSLP 种属:Human。抗体芯片检测原理

基于luminex平台的xMAP技术:Luminex:应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。原理:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达500个蛋白或基因。特点:1、既能检测蛋白,又能检测核酸2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平抗体芯片是LabEx现有MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式及ELISA等实验室技术平台。

抗体蛋白质芯片(Sengenics)LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务,现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台,助推科研进步!产品特点:自身抗体是疾病的表现,在疾病期间持续存在,为患者的健康状况提供宝贵的洞察。自身抗体:①特定目标:高度特异性的抗体/表位结合②疾病表现:作为免疫反应的结果而产生③早期出现:在疾病进展早期产生④稳定:易于存储和使用⑤丰富:在患者血清中发现高浓度的自身抗体①可获取性:血液样本⑥预测性:高度预测患者免疫状态特点:生物标志物发现:自身抗体生物标志物特征的鉴定患者分层:疾病内分层、队列识别和临床试验指南反应预测:预测反应者、无反应者和有不良事件风险的人CDx发展:建立伴随诊断发展的生物标志物特征

基于流式平台CBA:CBA(CytometricBeadArray),即微量样本多指标流式蛋白定量技术是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法,它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。CBA的原理通过利用一系列带有荧光标记的微小、分散的微球连接特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物,通过对应各种不同检测物的特异微球上所带有荧光强度不同从而同时测定分析样本中多种可溶性成分的数量。CBA的特点:1.能够同时对单个样本进行多种检测。2.较传统检测节省样本量9倍。3.灵敏度高、重复性好。4.所有分析只需一组标准曲线。5.避免酶联反应所致人工假象。6.节省操作和检测时间。本panel可检测以下因子:IL-1β,IL-6,IL-8,TNF-α 种属:Human。

本panel可检测以下因子:BAFF,BAFF-R/TNFRSF13C,BCMA/TNFRSF17,BDNF,CD20,CD27,CD28,CD40L(soluble),CD276/B7-H3,C-Peptide,CTACK,CTLA-4,ENA-78,Eotaxin,Eotaxin-2,Eotaxin-3,EPO,FGF(basic),FGF-23,FLT3L,Fractalkine,FSH,G-CSF,Ghrelin(active),Ghrelin(total),GIP(active),GIP(inactive),GIP(total),GITR/TNFRSF18,GITRL/TNFSF18,GLP-1(active),GLP-1(inactive),GM-CSF,gp130(soluble),GranzymeA,GranzymeB,GRO-α,HAVCR2/TIM-3,I-309,IFN-α2a,IFN-β,IFN-γ,IL-1α,IL-1β,IL-1RA,IL-2,IL-2Rα,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8,IL-9,IL-10,IL-12/IL-23p40,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-16,IL-17A,IL-17A/F,IL-17C,IL-17D,IL-17E/IL-25,IL-17F,IL-18,IL-21,IL-22,IL-23,IL-27,IL-29/IFN-λ1,IL-31,IL-33,Insulin,IP-10,I-TAC,LAG3,Leptin,LuteinizingHormone(LH),MCP-1,MCP-2,MCP-4,M-CSF,MDC,MIF,MIP-1α,MIP-1β,MIP-5,OX40/TNFRSF4,PD1(epitope1),PD1(epitope2),PD-L1(epitope1),PD-L2,PlGF,PP,Proinsulin,PYY(total),RANKL/TNFSF11,SDF-1α,Tie-2,TIGIT,TLR1,TNF-α,TNF-β,TPO,TRAIL,TSLP,VEGF-A,VEGF-D,YKL-40种属:HumanLabEx 因子检测技术有Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD等。人细胞因子抗体芯片

本panel可检测以下因子:Akt1 (total),Akt1 (Ser473) 种属:Human,Mouse,Rat。抗体芯片检测原理

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些?1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液,怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果?另外,不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是比较好的时间和次数。若不行,还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低;4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。抗体芯片检测原理

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