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多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。LabEx年多因子检测样本量达20w+！KITLG

抗体蛋白质芯片技术（Sengenics）优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位，可用于自身抗体结合（90%的抗体表位是非线性的）。与显示低信噪比的其他阵列相比，这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限＜10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体，只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内，线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时，0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。细胞因子多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。

抗体芯片技术服务包括：1.样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。2.蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4.抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。

单细胞功能组学（IsoPlexis）技术优势>在看似同质的细胞亚群内研究异质性>利用功能蛋白质数据层和免疫细胞比较免疫应答情况>通过多功能强度指数（PSI）建立参考点>优化试验以预测区分应答者和非应答者>表征导致身体状况/应答的生物学和功能驱动因素技术原理采用微流控技术，通过12,000个亚纳升级别的微室同时捕获上千个单细胞。搭配IsoCode芯片抗体条形码技术，捕获每个小室中单个活细胞分泌的多重蛋白质，或者对单细胞裂解后释放出的多种磷酸化蛋白进行捕获，然后通过基于ELISA原理的全自动化蛋白检测技术，捕获多重蛋白的荧光信号，一次可采集多达30种以上的功能蛋白质。在检测中从每个单细胞获得的蛋白质组信号将无缝传输到IsoSpeak生信分析软件，进行全自动分析和可视化呈现，并可直接用于文章发表。LabEx抗体芯片主要用于蛋白表达谱、蛋白质磷酸化及蛋白质相互作用等检测。

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？如何解决？1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；4)、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；5)、DAB孵育时间过长或浓度过高；6)、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要；7)、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。LabEx提供 细胞因子与信号通路蛋白多指标检测。IL-1F7

LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务！KITLG

上海乐备实生物技术有限公司（简称：乐备实）是优宁维的全资子公司，是国内主要专注于提供单/多因子相关检测分析的实验服务专家，目前已经扩展到多色流式检测服务和多色组化检测服务。LabEx成立于2018年，前身为成立于2015年的优宁维实验室服务事业部，总部位于上海。自成立以来，LabEx不断寻求突破，目前已发展成为具有成熟的样本制备、储存、管理、运输以及检测、数据分析等服务，我们有严格的实验室管理流程、标准化实验室操作、原始数据储存体系以及实验项目优化系统，努力打造在基因、细胞、蛋白、组织等水平的专业实验室技术平台。我们现有PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、流式、免疫组化等12个技术平台。通过线下和线上的方式为超过1000个客户提供服务，年检测样本超过20万，受到了广大客户的赞赏。LabEx继承优宁维的向正、向善、向上的价值观，我们的愿景是“服务加速研究-SpeedUpResearch”，努力为广大客户提供专业、安全的实验室服务，成为你科研的得力助手！KITLG

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