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时间:2023年01月31日 来源:

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些?如何解决?1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;4)、非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;5)、DAB孵育时间过长或浓度过高;6)、PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要;7)、标本染色过程中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。M-CSF

Luminex液相芯片检测实验技术服务原理:Luminex:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达500个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。目前,Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子,包括细胞因子、自身抗体、肿块物标志物等。LRG1LabEx提供酶联免疫吸附实验(ELISA)检测服务!

蛋白分析实验技术1、MSD超敏电化学发光平台针对550位北美和欧洲的生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发光技术的MSD(MesoScaleDiscovery)是较受欢迎的5大免疫分析品牌之一。可将WesternBlot从16小时缩短至4.5小时。基本原理:电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,是电化学和化学发光两个过程的完美结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后,电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。LabEx提供 炎症因子、趋化因子、生长因子等高通量高灵敏检测。

LUMINEX常见问题及解答(一)1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究,生物标记物开发,临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何?灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对,Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的?血清、血浆是常用的样本,每次检测需要10ul,每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测,制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息?检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右,基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性?检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司,产品经过了严格的质量控制。同时,我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。LabEx提供蛋白水平检测服务!IL-5

LabEx现在配备先进的实验室仪器:Luminex检测平台,流式检测平台,MSD检测平台等。M-CSF

免疫组化技术是用标记物标记的抗体与组织或细胞的抗原(如蛋白质、多肽、酶、***、病原体以及受体等)反应,结合形态学检查,对抗原作定性、定量、定位检测的技术。目前通常选用免疫酶组化间接染色法进行实验,利用该技术可进行细胞、亚细胞水平的检测。 **近几年,分子生物学研究异常活跃,但**终还要归到形态上来。用免疫组织化学方法对所研究的大分子进行定位,进而深入研究其功能。 分类:免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等 特点:具有特异性强、灵敏度高及能将形态研究与功能、代谢研究有机地结合在一起 实验标本:实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。 抗体:免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体M-CSF

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