人血淋巴细胞磁珠分选

时间:2023年02月13日 来源:

基于luminex平台的xMAP技术:Luminex:应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。原理:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达500个蛋白或基因。特点:1、既能检测蛋白,又能检测核酸2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平本panel可检测以下因子:MMP-3,MMP-12,MMP-13 种属:Human。人血淋巴细胞磁珠分选

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酶联免疫吸附实验(ELISA)优势:灵敏度高该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。特异性强其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上,将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时,一束激光照射磁珠上的荧光,识别磁珠标记的捕获抗体,从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子,从而实现“定性”作用。进一步,通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体,同步识别磁珠抓取的目标细胞因子,形成“三明治”结构,并加入SA-PE偶联上生物素,通过另一束激光照射进行信号放大检测,实现“定量”作用。多因子实验的正式实验,可以分批次检测。

酶联免疫斑点技术(Elispot)特点:酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。本panel可检测以下因子:ARG1,GOT1,GSTα,SDH,5'-NT/CD73 种属:Rat。人血淋巴细胞磁珠分选

本panel可检测以下因子:GLP-1 (active),Glucagon,Insulin 种属:Mouse。人血淋巴细胞磁珠分选

单细胞功能组学(IsoPlexis)技术优势>在看似同质的细胞亚群内研究异质性>利用功能蛋白质数据层和免疫细胞比较免疫应答情况>通过多功能强度指数(PSI)建立参考点>优化试验以预测区分应答者和非应答者>表征导致身体状况/应答的生物学和功能驱动因素技术原理采用微流控技术,通过12,000个亚纳升级别的微室同时捕获上千个单细胞。搭配IsoCode芯片抗体条形码技术,捕获每个小室中单个活细胞分泌的多重蛋白质,或者对单细胞裂解后释放出的多种磷酸化蛋白进行捕获,然后通过基于ELISA原理的全自动化蛋白检测技术,捕获多重蛋白的荧光信号,一次可采集多达30种以上的功能蛋白质。在检测中从每个单细胞获得的蛋白质组信号将无缝传输到IsoSpeak生信分析软件,进行全自动分析和可视化呈现,并可直接用于文章发表。人血淋巴细胞磁珠分选

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