流式细胞仪图像分析

时间:2023年03月09日 来源:

Luminex液相悬浮芯片利用梯度稀释的标准品检测信号,构建标准曲线,还可对96孔微孔板中的样品的多种细胞因子进行同步相对定量。Luminex液相悬浮芯片的技术优势远超传统ELISA,特别适合大批量样本中多个特定因子的定量检测。由于Luminex悬浮芯片的规格是1张芯片可以检测多达78例样本,许多研究人员在日常实验研究(例如动物实验、细胞实验)中往往只有十几例到几十例不等的样品需要检测,用整张Luminex芯片就存在浪费情况。为帮助广大研究人员在样本数量较少的时候也能够享受Luminex芯片技术带来高质量数据及便利。LabEx推荐出使用频率和稳定性均靠前的Luminex芯片开展全国研究人员“拼板”业务。每张芯片多可检测80例样本,参与拼板的项目10例起拼,拼板成功立即启动实验,两周内即出报告!LabEx多因子检测技术应用。流式细胞仪图像分析

基于MSD平台的电化学发光超敏多因子检测技术MSD(MesoScaleDiscovery)原理:MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESOSector600或QuickplexSQ120。通过点阵技术,在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标/孔的筛选检测。特点:1、更高灵敏度与更宽的线性范围:灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log。2、节省样本用量,可实现多重检测:上样量≤25ul,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。3、均一性、重复性高:板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月,为长时间研究项目,提供了使用同一批号试剂的可能性。4、样本兼容度高,基质效应小5、实验流程简便、快速、多元化6、信号稳定且不受显色顺序影响7、开放性平台,高载量的石墨电极,多样化实验方案,更节省的包被用量。多重荧光免疫组化的染色抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。

LabEx可提供的服务及优势(二)LabEx服务的优势:1、专业的抗体公司;2、先进的实验仪器平台;3、可靠、放心的结果;4、实惠、亲民的价格;5、认真、严谨的工作态度。Luminex平台服务:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种荧光免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此利用微球技术,可以同时检测高达500个蛋白或基因。MSD(MesoScaleDiscovery):将WesternBlot从16小时缩短至4.5小时。针对550位北美和欧洲的生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发光技术的MSD(MesoScaleDiscovery)是较受欢迎的5大免疫分析品牌之一。CBA(CytometricBeadsArray):即细胞因子微球检测技术。是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法,它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些?1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液,怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果?另外,不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是比较好的时间和次数。若不行,还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低;4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。LabEx细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别对各种产生积极反应的细胞因子的独特组合。

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,比较好是4的倍数,否则会造成浪费。LabEx 流式平台:BD C6,BD celesta,BD calibur,12色流式检测分析。flowjo软件进行倍体分析

LabEx流式染色服务:现可进行流式celesta 12色染色,细胞培养加染色一条龙。流式细胞仪图像分析

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标,如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多,但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测,同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测,操作繁琐,且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户,传统的技术无法满足需要。日常实验中,常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测,如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析,由于这些因子的含量较少,低于一般常规方法的检测下限,使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少(25~60μL/孔),检测指标多,可兼容血清/血浆,细胞上清,细胞/组织裂解液,脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高(部分panel可达到亚fg/ml),宽线性范围(达到6个log),具有高重复性(板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%),适宜多类型指标的同时测定(炎症,趋化,代谢……)。流式细胞仪图像分析

上海乐备实生物技术有限公司是以提供标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务为主的有限责任公司(自然),公司始建于2018-04-28,在全国各个地区建立了良好的商贸渠道和技术协作关系。乐备实生物致力于构建医药健康自主创新的竞争力,多年来,已经为我国医药健康行业生产、经济等的发展做出了重要贡献。

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