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LUMINEX常见问题及解答（一）1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。细胞因子检测是一个强大的工具，通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。Ccl9

流式多因子检测技术(CBA)微球免疫分析系统CBA（CytometricBeadArray）是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。CBA是种结合流式细胞仪荧光检测和微球免疫分析的应用技术，可以轻松的在短时间内，同时检测多种蛋白，其作用原理利用荧光强度不同的微球，上面带有可以辨认特定蛋白的抗体（captureantibody），与样本（例如血清、血浆、培养上清液、细胞裂解液等）及PE检测抗体（detectionantibody）作用后，以流式细胞仪进行分析，根据PE荧光强度的不同用FCAPArray软件进行分析和标准品做比对后，可进行样本内特定，蛋白的定性或定量。CBA具有以下优点：每次检测需25-50ul样本；灵敏度可达0.274pg/ml时间t夬速，需3-4小时，快速上样可同时测定30种蛋白，实验可重复性高利用FCAPArray软件，不论样本数目多少，可快速分析完成分析FGF4多因子技术样本需求量少，检测指标多，可兼容血清，裂解液，脑脊液等多种生物学体液。

问：因子检测技术有哪些？答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问：多因子实验适用的样本类型有哪些？答:Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。问：如何计算96孔板可做多少样本？答:标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本；问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。（2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。（3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，建议是4的倍数，否则会造成浪费。

抗体蛋白质芯片技术（Sengenics）优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位，可用于自身抗体结合（90%的抗体表位是非线性的）。与显示低信噪比的其他阵列相比，这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限＜10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体，只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内，线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时，0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。LabEx多因子检测技术（包括luminex、MSD等），所需样本量少，检测指标丰富。

MSD经典10因子推荐：中检院《CAR-T细胞医治产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到，使用MSD技术检测CAR-T细胞医治后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。MSD技术－电化学发光和点阵技术MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的电化学发光免疫分析）技术是基于ELISA基本原理的升级，在板底通电从而激发标记物SULFO-TAG发光并由CCDCamera进行信号采集；MSDECL技术提高免疫分析的灵敏度，延伸了线性范围。MSD通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测，同时实现多个指标定量。MSD技术独具一格的“六合一”特点：亚fg/ml灵敏度，低背景，多靶点检测，6个数量级线性范围，适用于不同样本基质（血清／血浆，细胞培养上清，脑脊液，尿液，组织匀浆，细胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）,5-25ul微量样本检测。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、TH1/TH2通路重要指标多因子组合检测限。试剂我们提供；检测我们来做，助您的时间更有价值！蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。IGFBP-1

LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技术服务！Ccl9

液态流式技术(Luminex)特点:多重检测：理论上可同时检测100种生物靶标。节省样品：只需低至25μl的样品体积。高灵敏度：精确定量下限低至0.1pg/mL。应用范围应用领域：免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。分析物类型：细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。其他应用：信号通路、重大疾病相关、Biomarker开发、临床应用。Ccl9

上海乐备实生物技术有限公司是一家从事生物科技、生物制品、医药科技领域的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务，检验技术的研发，从事货物及技术的进出口业务，化工产品及原料（除危险化学品、监控化学品、易制毒化学品）、实验室耗材与设备的销售。 【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】的公司，致力于发展为创新务实、诚实可信的企业。乐备实生物作为医药健康的企业之一，为客户提供良好的标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务。乐备实生物继续坚定不移地走高质量发展道路，既要实现基本面稳定增长，又要聚焦关键领域，实现转型再突破。乐备实生物始终关注自身，在风云变化的时代，对自身的建设毫不懈怠，高度的专注与执着使乐备实生物在行业的从容而自信。