链霉亲和素磁珠分选步骤

时间:2023年04月19日 来源:

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。本panel可检测以下因子:Caspase-3,p53,PARP 种属:Human。链霉亲和素磁珠分选步骤

抗体芯片实验室服务思考留给科研,实验外包出去!抗体芯片是蛋白芯片的一种,具有微型化、集成化、高通量化的特点,可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度,目前主要用于信号转异、蛋白质组学、肿块物及其他疾病的相关研究。抗体芯片检测的样本类型包括提取物、细胞培养上清、血清血浆等,检测的方式通过生物素标记的方法完成样本标记,然后芯片孵育,样本中相关蛋白与芯片上特异性抗体结合,通过荧光的方式使用芯片扫描仪检测。实验获得的数据将通过标准的数据处理流程进行分析。抗体芯片检测的优点:灵敏度高、特异性好、重复性佳、准确性高抗体芯片的检测内容包括:抗体芯片主要用于蛋白表达谱、蛋白质磷酸化及蛋白质相互作用等检测链霉亲和素磁珠分选步骤本panel可检测以下因子:sCD14,sCD26,Endostatin,pGRN,LRG1,MCAM/sCD146,ucMGP 种属:Human。

本panel可检测以下因子:HMWAdiponectin/Acrp30,ALCAM/CD166,alpha-Fetoprotein/AFP,Angiopoietin-likeProtein4/ANGPTL4,AP RIL/TNFSF13,AtrialNatriureticPeptide/ANP,beta2-Microglobulin,BMP-4,BMP-7,BMP-10,C-Peptide,CA15-3/MUC-1,CalbindinD,CCL14/HCC-1/HCC-3,CCL15/MIP-1delta,CCL24/Eotaxin-2/MPIF-2,Chemerin,ComplementC5a,Cripto,CXCL1/GROalpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRObeta/MIP-2/CINC-3,CXCL4/PF4,CXCL6/GCP-2,ENPP-2/Autotaxin,FABP4/A-FABP,Furin,HB-EGF,IL-3,IL-18/IL-1F4,IL-19,IL-28A/IFN-lambda2,IL-33,Kallikrein3/PSA,M-CSF,MFG-E8,Myeloperoxidase/MPO,NT-3,Periostin/OSF-2,Progranulin/PGRN,Renin,S100A9,SP-D,TFPI,Thrombomodulin/BDCA-3,TRAIL/TNFSF10,VEGF-C种属:Human

多重荧光免疫组化技术优势1.由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应,以及一抗二抗种属匹配问题,减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。2.TSA技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪酰胺的信号放大技术能够提供极强的敏感度、检测极微量的目的抗原。极大的降低抗体的用量,节约抗体,实测确实可以提升抗体的稀释比例。3.荧光法多重免疫组化,可同时进行五个颜色通道以上,这种情况下发射光谱会重叠,我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所做不到的。这种方法能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系,从而极大地节约珍贵的样品。LabEx多因子检测:luminex平台**pannel,筛选验证同步进行,省时省力。

Luminex液相悬浮芯片利用梯度稀释的标准品检测信号,构建标准曲线,还可对96孔微孔板中的样品的多种细胞因子进行同步相对定量。Luminex液相悬浮芯片的技术优势远超传统ELISA,特别适合大批量样本中多个特定因子的定量检测。由于Luminex悬浮芯片的规格是1张芯片可以检测多达78例样本,许多研究人员在日常实验研究(例如动物实验、细胞实验)中往往只有十几例到几十例不等的样品需要检测,用整张Luminex芯片就存在浪费情况。为帮助广大研究人员在样本数量较少的时候也能够享受Luminex芯片技术带来高质量数据及便利。LabEx推荐出使用频率和稳定性均靠前的Luminex芯片开展全国研究人员“拼板”业务。每张芯片多可检测80例样本,参与拼板的项目10例起拼,拼板成功立即启动实验,两周内即出报告!本panel可检测以下因子:IL-1β,IL-6,IL-12p70,IL-15,IL-23,IP-10,MCP-1,MIP-1α,TNF-α 种属:Mouse。蛋白芯片ppt

流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。链霉亲和素磁珠分选步骤

抗体芯片技术服务包括:1.样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂,匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清,则直接进入步骤3。2.蛋白质定量:按蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50-500ug蛋白质(若标本为血清,通常取100ul血清)与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4.抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本(血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本),本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。链霉亲和素磁珠分选步骤

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