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时间:2023年04月29日 来源:

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些?1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液,怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果?另外,不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是比较好的时间和次数。若不行,还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低;4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。EN-RAGE

Luminex液相悬浮芯片利用梯度稀释的标准品检测信号,构建标准曲线,还可对96孔微孔板中的样品的多种细胞因子进行同步相对定量。Luminex液相悬浮芯片的技术优势远超传统ELISA,特别适合大批量样本中多个特定因子的定量检测。由于Luminex悬浮芯片的规格是1张芯片可以检测多达78例样本,许多研究人员在日常实验研究(例如动物实验、细胞实验)中往往只有十几例到几十例不等的样品需要检测,用整张Luminex芯片就存在浪费情况。为帮助广大研究人员在样本数量较少的时候也能够享受Luminex芯片技术带来高质量数据及便利。LabEx推荐出使用频率和稳定性均靠前的Luminex芯片开展全国研究人员“拼板”业务。每张芯片多可检测80例样本,参与拼板的项目10例起拼,拼板成功立即启动实验,两周内即出报告!EN-RAGELabEx年多因子检测样本量达20w+!

酶联免疫斑点技术(Elispot)特点:酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。

抗体蛋白质芯片技术(Sengenics)优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位,可用于自身抗体结合(90%的抗体表位是非线性的)。与显示低信噪比的其他阵列相比,这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限<10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体,只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内,线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时,0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。LabEx流式染色服务:现可进行流式celesta 12色染色,细胞培养加染色一条龙。

1)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。3)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。4)如何控制LUMINEX检测的质量?我们对每一次检测都设定标准曲线,并设定内参进行校正。我们会定期做仪器校正,检测精密度和重复性实验以确保检测结果的可靠性。LabEx提供单细胞功能组学(IsoPlexis)服务!PGF

LabEx多因子检测技术--液相悬浮技术。EN-RAGE

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