小鼠外周血 细胞因子检测

Q：样本保存要求和保存时间?A：保存要求：<-20℃保存，-80℃保存更佳，避免反复冻融，冻融超过两次的样本不可使用。保存时间：越短越好，不超过3个月为佳Q：什么样的样本会比较容易测出？A：根据我们统计的数据来看，并没有这样的说法，需要做实验才可以确认，并且每个客户的样本模型都是不一样的，并没有参考性Q：裂解液有什么要求？A：不含SDS和NP40等离子去垢剂成分的裂解液，比较建议爱必信产品（abs47047636）Q：样本量需求？A：可登陆试剂盒官方网站查询，一般在试剂盒详情页面中都有，或直接查看说明书。通常用量在50-200ul。实验室打包服务为100ul/孔LabEx 提供人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、信号通路重要指标多因子组合检测。小鼠外周血 细胞因子检测

基于luminex平台的xMAP技术：Luminex：应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。特点：1、既能检测蛋白，又能检测核酸2、既能用于临床，又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测，一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平电化学发光MSD数据修改LabEx提供28种抗体芯片，用于人，小鼠和大鼠物种的蛋白检测。

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。

酶联免疫斑点技术（Elispot）LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！随着酶免疫分析技术在医学及生物学领域的较广的应用，使体外检测各种细胞因子和抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时，以往人们常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体，但由于游离的循环抗体或CK半衰期不同，使之在体液中不断地被代谢，而不能确切地反应体内抗体及CK水平。80年代中期等根据ELISA技术的基本原理，建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术，因其具有较高的特异性和敏感性，目前正被国内外较广的应用，对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率测定。

基于MSD平台的电化学发光超敏多因子检测技术MSD（MesoScaleDiscovery)原理：MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESOSector600或QuickplexSQ120。通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标/孔的筛选检测。特点:1、更高灵敏度与更宽的线性范围：灵敏度可达0.05pg/ml，有效线性范围达6log。2、节省样本用量，可实现多重检测：上样量≤25ul，为珍稀样本的研究提供了更多的数据。3、均一性、重复性高：板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月，为长时间研究项目，提供了使用同一批号试剂的可能性。4、样本兼容度高，基质效应小5、实验流程简便、快速、多元化6、信号稳定且不受显色顺序影响7、开放性平台，高载量的石墨电极，多样化实验方案，更节省的包被用量。LabEx MSD提供了更为便捷快速的实验流程，通常只需4-5小时，即可完成整个检测流程。流式细胞分选检测服务

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LUMINEX常见问题及解答（二）6)客户自己提供抗体，是否可以进行LUMINEX检测？Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是，需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白，LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测？可以用于基因表达，基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义？表达差异主要取决于标本的性质和数量，我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术，检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大，是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子，而且检测速度较慢，不适合高通量分析。由此可见，两种方法应用方向有很大差别。小鼠外周血 细胞因子检测

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