药物靶点筛选时应答百分率

基于流式平台CBA：CBA（CytometricBeadArray），即微量样本多指标流式蛋白定量技术是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。CBA的原理通过利用一系列带有荧光标记的微小、分散的微球连接特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物，通过对应各种不同检测物的特异微球上所带有荧光强度不同从而同时测定分析样本中多种可溶性成分的数量。CBA的特点：1.能够同时对单个样本进行多种检测。2.较传统检测节省样本量9倍。3.灵敏度高、重复性好。4.所有分析只需一组标准曲线。5.避免酶联反应所致人工假象。6.节省操作和检测时间。LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率测定。药物靶点筛选时应答百分率

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？如何解决？1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；4)、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；5)、DAB孵育时间过长或浓度过高；6)、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要；7)、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。磁珠分选的二抗本panel可检测以下因子：GM-CSF,IFN-γ,IL-10,IL-12(p70),IL-13,IL-2,IL-4,IL-5,TNF-α 种属：Human。

免疫组化技术是用标记物标记的抗体与组织或细胞的抗原(如蛋白质、多肽、酶、***、病原体以及受体等)反应，结合形态学检查，对抗原作定性、定量、定位检测的技术。目前通常选用免疫酶组化间接染色法进行实验，利用该技术可进行细胞、亚细胞水平的检测。**近几年，分子生物学研究异常活跃，但**终还要归到形态上来。用免疫组织化学方法对所研究的大分子进行定位，进而深入研究其功能。分类：免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等特点：具有特异性强、灵敏度高及能将形态研究与功能、代谢研究有机地结合在一起实验标本：实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。抗体：免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体

酶联免疫吸附实验(ELISA)优势：灵敏度高该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。特异性强其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。LabEx提供 炎症因子、趋化因子、生长因子等高通量高灵敏检测。

本panel可检测以下因子：BAFF,BAFF-R/TNFRSF13C,BCMA/TNFRSF17,BDNF,CD20,CD27,CD28,CD40L(soluble),CD276/B7-H3,C-Peptide,CTACK,CTLA-4,ENA-78,Eotaxin,Eotaxin-2,Eotaxin-3,EPO,FGF(basic),FGF-23,FLT3L,Fractalkine,FSH,G-CSF,Ghrelin(active),Ghrelin(total),GIP(active),GIP(inactive),GIP(total),GITR/TNFRSF18,GITRL/TNFSF18,GLP-1(active),GLP-1(inactive),GM-CSF,gp130(soluble),GranzymeA,GranzymeB,GRO-α,HAVCR2/TIM-3,I-309,IFN-α2a,IFN-β,IFN-γ,IL-1α,IL-1β,IL-1RA,IL-2,IL-2Rα,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8,IL-9,IL-10,IL-12/IL-23p40,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-16,IL-17A,IL-17A/F,IL-17C,IL-17D,IL-17E/IL-25,IL-17F,IL-18,IL-21,IL-22,IL-23,IL-27,IL-29/IFN-λ1,IL-31,IL-33,Insulin,IP-10,I-TAC,LAG3,Leptin,LuteinizingHormone(LH),MCP-1,MCP-2,MCP-4,M-CSF,MDC,MIF,MIP-1α,MIP-1β,MIP-5,OX40/TNFRSF4,PD1(epitope1),PD1(epitope2),PD-L1(epitope1),PD-L2,PlGF,PP,Proinsulin,PYY(total),RANKL/TNFSF11,SDF-1α,Tie-2,TIGIT,TLR1,TNF-α,TNF-β,TPO,TRAIL,TSLP,VEGF-A,VEGF-D,YKL-40种属：HumanLabEx 免疫组化平台：包埋，切片，染色，多重荧光组化，以及病理分析（HALO）。mapk信号通路图

本panel可检测以下因子：Aβ38 (6E10),Aβ40 (6E10),Aβ42 (6E10) 种属：Human。药物靶点筛选时应答百分率

问：因子检测技术有哪些？答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问：多因子实验适用的样本类型有哪些？答:Serum（血清）、 sma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。问：如何计算96孔板可做多少样本？答:标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本；问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。（2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。（3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，建议是4的倍数，否则会造成浪费。药物靶点筛选时应答百分率

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