酶联免疫斑点检测技术

Luminex液相芯片检测实验技术服务 原理： Luminex：应用微球和流式细胞仪的原理， 微球内部含有三种免疫荧光， 通过荧光不同的比例可以区分 500 种不同的微球。 每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。 因此， 利用微球技术， 可以同时检测高达 500 个蛋白或基因。 Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量，节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。 目前，Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子，包括细胞因子、自身抗体、肿块物标志物等。LabEx多因子检测技术应用。酶联免疫斑点检测技术

LabEx多因子检测技术－－液相悬浮技术 经典炎症十因子、高通量细胞因子初筛 液相悬浮芯片：高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于 96 孔微孔板中。进一步加 入生物素标记的高亲和配对二抗结合 SA-PE 进行信号放大，以实现对多种微量细胞因子的有效检测。利用梯度稀释的标准品检测信 号构建标准曲线，实现大量目标样本中多因子的同时检测和准确定量。 特点 1、既能检测蛋白，又能检测核酸 2、既能用于临床，又能用于多学科科研领域 3、真正意义的“高通量”检测，一次检测100个指标 4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平 luminex检测RNALabEx 流式平台：BD C6，BD celesta，BD calibur，12色流式检测分析。

酶联免疫吸附实验(ELISA)优势： 灵敏度高 该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。 特异性强 其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。


流式多因子检测技术(CBA) 微球免疫分析系统CBA （Cytometric Bead Array）是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单 个样品中的多个指标进行检测。 CBA是种结合流式细胞仪荧光检测和微球免疫分析的应用技术，可以轻 松的在短时间内，同时检测多种蛋白，其作用原理利用荧光强度不同的微 球，上面带有可以辨认特定蛋白的抗体（capture antibody ），与样本（例 如血清、血浆、培养上清液、细胞裂解液等）及PE检测抗体（detection antibody）作用后，以流式细胞仪进行分析，根据PE荧光强度的不同用 FCAP Array软件进行分析和标准品做比对后，可进行样本内特定，蛋白的 定性或定量。 CBA具有以下优点： 每次检测需25-50ul 样本；灵敏度可达 0.274pg/ml 时间t夬速，需 3-4小时，快速上样 可同时测定30种 蛋白，实验可重复性高 利用FCAP Array软件， 不论样本数目多少，可 快速分析完成分析 LabEx实验服务项目涵盖：基因蛋白细胞组织四个层面。

抗体蛋白质芯片技术（Sengenics）优势 1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护 2、特异性 蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位，可用于自身抗体结合（90% 的抗体表位是非线性的）。与显示低信噪比的其他阵列相比，这会带来特定的命中和低背景噪音。 3、检测限＜10pg/ml 蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体，只需要 1 - 10 μL 血清。检测限在10 pg/ml 范围内，线性动态范围至少为 5个数量级。 4、高重复性 Sengenics 蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的 6524 个蛋白质数据点的自身抗体水平时，0.97以上的近乎完美 的 Pearson 相关性。 5、一致性高 Sengenics KREXTM 蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了 Immunome 蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%) 百分比。Immunome的平均 CV% 为 7.2%。高通量蛋白组学（Olink）采用独有的 PEA，邻位延伸分析技术检测蛋白标志物。msd电化学发光免疫

CBA，细胞因子微球检测技术，是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法。酶联免疫斑点检测技术

问：因子检测技术有哪些？ 答: Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。 问：多因子实验适用的样本类型有哪些？ 答: Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/ Tissue lysate（细胞/组织裂解液）、Cerebrospinal Fluid（脑脊液）、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。 问：如何计算96孔板可做多少样本？ 答: 标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本； 问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？ 答: 可以，但是有如下要注意： （1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。 （2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。 （3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，建议是4的倍数，否则会造成浪费。 酶联免疫斑点检测技术

上海乐备实生物技术有限公司属于医药健康的高新企业，技术力量雄厚。是一家有限责任公司（自然）企业，随着市场的发展和生产的需求，与多家企业合作研究，在原有产品的基础上经过不断改进，追求新型，在强化内部管理，完善结构调整的同时，良好的质量、合理的价格、完善的服务，在业界受到宽泛好评。公司始终坚持客户需求优先的原则，致力于提供高质量的标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务。乐备实生物顺应时代发展和市场需求，通过高端技术，力图保证高规格高质量的标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务。