细胞因子受体

时间:2022年04月19日 来源:

神经疾病研究作为近几年的热点研究,其研究集中点主要在于神经退行性疾病(阿尔兹海默症AD、帕金森综合症PD……)、早期认知障碍(MCI)、抑郁、毒瘾等方向。 神经退行性疾病, 传统通过影像学技术拍片观测脑部淀粉样堆积情况评估疾病进程, 但模型动物或病人脑部出现淀粉样堆积往往在疾病发生中晚期。 通过检测Biomarker, 可以更早的预测疾病发生, 更好的评估药物疗效和毒副作用。 从研究指标上看,从神经退行性指标(Aβ、Tau、NFL等)到神经炎症,再到相关生物标志物的检测,都是相应研究者热捧的对象; 从检测样本看,CSF脑脊液、血清血浆、细胞上清等,都有囊括。 研究手段 多因子检测作为高效的检测手段,被广泛应用在神经疾病研究中,LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗体芯片在内的多因 子检测服务。 LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务!细胞因子受体

LUMINEX常见问题及解答(一) 1) LUMINEX应用于哪些领域? 生物医学研究,生物标记物开发,临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。 2) LUMINEX敏感性如何? 灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对,Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。 3) 对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的? 血清、血浆是常用的样本,每次检测需要10ul, 每次可以检测多个蛋白。 从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测,制备方法与ELISA、Western Blot完全一样。 4) 一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息? 检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。 蛋白质检测目前可以达到50个左右,基因检测可达500个。 5) 如何保证检测结果的特异性? 检测的特异性取决于抗体高特异性。 试剂几乎全部来源于美国大公司,产品经过了严格的质量控制。同时,我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。 细胞因子受体流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。

液态流式技术(Luminex) 流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式 原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体,多指标并行分析,可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子; 具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点;可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。 基本原理: 应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用 来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达100个蛋白或基因。 Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对 不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多 目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。

酶联免疫斑点技术(Elispot)技术优势 (1) 单细胞水平,活细胞功能检测:弥补了体液中CK半衰期短的不足,当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT 法检测具有较高灵敏性。 (2) 操作简便经济,可以进行高通量筛选:既可检测自发分泌细胞,又可检测抗原特异性CK分泌细胞,具有较高特异性,并可观察药物治疗反应,且使对CSF中T、B细胞研究成为可能,对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。 (3)灵敏度高:在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。

酶联免疫吸附实验(ELISA)优势: 灵敏度高 该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。 特异性强 其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。
蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。th1型细胞因子

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酶联免疫斑点技术(Elispot)特点: 酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linked Immunospot Assay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。 实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。细胞因子受体

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