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时间:2022年05月25日 来源:

酶联免疫斑点技术(Elispot) LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务,现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCR Array、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台,助推科研进步! 随着酶免疫分析技术在医学及生物学领域的较广的应用,使体外检测各种细胞因子和抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时,以往人们常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK半衰期不同,使之在体液中不断地被代谢,而不能确切地反应体内抗体及CK水平。80年代中期等根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术,因其具有较高的特异性和敏感性,目前正被国内外较广的应用,对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。LabEx 多因子检测平台:抗体芯片,液相芯片,电化学技术为主的多种检测技术。PROK1

酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。 基本原理:它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。 测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。
其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪) 加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。
TNF-a为啥高分的文章用的都在做细胞因子的检测?

酶联免疫斑点技术(Elispot)特点: 酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linked Immunospot Assay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。 实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。 LabEx提供 细胞因子与信号通路蛋白多指标检测。

基于luminex平台的xMAP技术: Luminex :应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。 原理: 应用微球和流式细胞仪的原理, 微球内部含有三种免疫荧光, 通过荧光不同的比例可以区分 500 种不同的微球。 每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。 因此, 利用微球技术, 可以同时检测高达 500 个蛋白或基因。 特点: 1、既能检测蛋白,又能检测核酸 2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域 3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标 4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平 LabEx提供抗体芯片技术(Antibody Array)服务!SAA

细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。PROK1

LabEx提供抗体芯片技术服务,您只需提供保存完好的标本(组织、细胞培养上清、血清、血浆),本公司的芯片技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析,向您提供由您所选的任何一种芯片的实验结果,可以为您节省大量的时间与精力。 蛋白芯片技术特点: 作为一种快速、灵敏而又经济的工具,蛋白芯片能同时检测单个样品中多种分析物的相对水平。蛋白芯片的使用不需要任何特殊的仪器,也取代了多次免疫沉淀/ Western blot实验。每个芯片在设计时都利用了精心挑选的捕获抗体,它们在硝酸纤维素膜上重复点样两次。经多项研究证实,蛋白芯片能简化鉴定蛋白所需的筛选过程。 蛋白芯片高通量定性分析试剂盒比WB的灵敏度高100倍;更有大规模多分子高通量筛选作用,通过监控蛋白水平和一些蛋白翻译后修饰的变化,能迅速靶定目标分子,以便进一步的研究。 PROK1

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