流式细胞凋亡试剂盒

时间:2022年06月27日 来源:

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标,如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多,但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测,同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测,操作繁琐,且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户,传统的技术无法满足需要。日常实验中,常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测,如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析,由于这些因子的含量较少,低于一般常规方法的检测下限,使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少(25~60μL/孔),检测指标多,可兼容血清/血浆,细胞上清,细胞/组织裂解液,脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高(部分panel可达到亚fg/ml),宽线性范围(达到6个log),具有高重复性(板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%),适宜多类型指标的同时测定(炎症,趋化,代谢……)。抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。流式细胞凋亡试剂盒

液态流式技术(Luminex)特点:多重检测:理论上可同时检测100种生物靶标。节省样品:只需低至25μl的样品体积。高灵敏度:精确定量下限低至0.1pg/mL。应用范围应用领域:免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。分析物类型:细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。其他应用:信号通路、重大疾病相关、Biomarker开发、临床应用。脾脏做流式细胞分析高通量蛋白组学(Olink)采用独有的 PEA,邻位延伸分析技术检测蛋白标志物。

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测?A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。Q:为什么要做预实验?A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗?A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,比较好是4的倍数,否则会造成浪费。LabEx年多因子检测样本量达20w+!磁珠分选细胞量

LabEx多因子检测技术应用。流式细胞凋亡试剂盒

酶联免疫斑点技术(Elispot)LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务,现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台,助推科研进步!随着酶免疫分析技术在医学及生物学领域的较广的应用,使体外检测各种细胞因子和抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时,以往人们常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK半衰期不同,使之在体液中不断地被代谢,而不能确切地反应体内抗体及CK水平。80年代中期等根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术,因其具有较高的特异性和敏感性,目前正被国内外较广的应用,对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。流式细胞凋亡试剂盒

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