流式细胞分析ppt

免疫组化技术是用标记物标记的抗体与组织或细胞的抗原(如蛋白质、多肽、酶、***、病原体以及受体等)反应，结合形态学检查，对抗原作定性、定量、定位检测的技术。目前通常选用免疫酶组化间接染色法进行实验，利用该技术可进行细胞、亚细胞水平的检测。**近几年，分子生物学研究异常活跃，但**终还要归到形态上来。用免疫组织化学方法对所研究的大分子进行定位，进而深入研究其功能。分类：免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等特点：具有特异性强、灵敏度高及能将形态研究与功能、代谢研究有机地结合在一起实验标本：实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。抗体：免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体本panel可检测以下因子：IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,TNF-α 种属：Human。流式细胞分析ppt

单细胞功能组学（IsoPlexis）LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！产品特点作为蛋白组学全新技术，为了解答免疫应答相关问题，研究人员经常需要制定策略及技术。功能蛋白质组学主要利用分泌蛋白质组在免疫应答启动和调节中的重要作用，并与细胞信号转导建立直接关联。通过测量与免疫应答直接相关的功能性细胞外细胞因子，以实现完整的细胞定义。在看似同质的细胞群体中，总是存在不同程度的细胞异质性。当我们在单细胞水平上研究和表征细胞功能时，尤其如此。一整群细胞的行为通常是由一小群多功能性的细胞亚群驱动的，它可能只占当前所有细胞的20-30%。该技术可通过对每个免疫细胞进行功能性免疫谱分析，实现完全的单细胞功能表征，从而帮助发现更好的生物标记物，加速医治开发。检测罕见的“超级细胞”亚群，以揭示持久性、效力和耐用性等功能性生物学驱动因子。抗体芯片 磷酸化本panel可检测以下因子：proMMP-9,MMP-12 种属：Mouse。

抗体芯片技术服务包括：1，样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。2，蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4，抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。

本panel可检测以下因子：BDNF,CCL2/JE/MCP-1,CCL5/RANTES,CCL11/Eotaxin,CCL20/MIP-3 alpha,CD40 Ligand/TNFSF5,CXCL2/GRO beta/MIP-2/CINC-3,CXCL10/IP-10/CRG-2,CXCL11/I-TAC,CXCL13/BLC/BCA-1,FGF basic/FGF2/bFGF,G-CSF,GM-CSF,Granzyme B,IFN-alpha,IFN-beta,IFN-gamma,IL-1 beta/IL-1F2,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,IL-10,IL-12 p70,IL-13,IL-15,IL-17/IL-17A,IL-21,PD-L1/B7-H1,PDGF-AA,PDGF-BB,TGF-alpha,TNF-alpha,VEGF 种属：Primate本panel可检测以下因子：Ghrelin,GIP,GLP-1,Glucagon,Insulin,Leptin,PAI-1,Resistin 种属：Mouse。

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时，一束激光照射磁珠上的荧光，识别磁珠标记的捕获抗体，从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子，从而实现“定性”作用。进一步，通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体，同步识别磁珠抓取的目标细胞因子，形成“三明治”结构，并加入SA-PE偶联上生物素，通过另一束激光照射进行信号放大检测，实现“定量”作用。本panel可检测以下因子：Akt2 (total),Akt2 (Ser474) 种属：Human,Mouse,Rat。抗体芯片 磷酸化

本panel可检测以下因子：Insulin,Leptin 种属：Mouse。流式细胞分析ppt

基于luminex平台的xMAP技术：Luminex：应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。特点：1、既能检测蛋白，又能检测核酸2、既能用于临床，又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测，一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平流式细胞分析ppt

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