luminex和抗体芯片

时间:2022年08月10日 来源:

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理:它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。本panel可检测以下因子:sCD14,sCD26,Endostatin,pGRN,LRG1,MCAM/sCD146,ucMGP 种属:Human。luminex和抗体芯片

本panel可检测以下因子:CTACK,ENA-78,Eotaxin,Eotaxin-2,Eotaxin-3,FLT3L,Fractalkine,G-CSF,GM-CSF,GRO-α,I-309,IFN-α2a,IFN-γ,IL-1α,IL-1β,IL-1RA,IL-2,IL-2Rα,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8,IL-9,IL-10,IL-12/IL-23p40,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-16,IL-17A,IL-17A/F,IL-17B,IL-17C,IL-17D,IL-17F,IL-18,IL-22,IL-23,IP-10,I-TAC,MCP-1,MCP-2,MCP-3,MCP-4,M-CSF,MDC,MIF,MIP-1α,MIP-1β,MIP-3α,MIP-3β,MIP-5,SDF-1α,TARC,TNF-α,TNF-β,TPO,TRAIL,VEGF-A,YKL-40 种属:Non-human Primate流式抗体多因子实验的正式实验,可以分批次检测。

抗体芯片技术服务包括:1.样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂,匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清,则直接进入步骤3。2.蛋白质定量:按蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50-500ug蛋白质(若标本为血清,通常取100ul血清)与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4.抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本(血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本),本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。

1)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。3)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。4)如何控制LUMINEX检测的质量?我们对每一次检测都设定标准曲线,并设定内参进行校正。我们会定期做仪器校正,检测精密度和重复性实验以确保检测结果的可靠性。LabEx 免疫组化平台:包埋,切片,染色,多重荧光组化,以及病理分析(HALO)。

MSD超敏电化学发光技术优势:1)更高灵敏度与更宽的线性范围MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log(从亚皮克级到几万皮克),能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。2)样本兼容度高,基质效应小MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小(如粘稠样本,悬浊颗粒样本等),因此对于各类生物学样本的兼容度高。目前测定样本包括但不限于:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物学样本。3)节省样本用量,可实现多重检测传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100uloMSD通过点阵技术,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。4)实验流程简便、快速、多元化MSD提供了更为便捷快速的实验流程,通常只需4-5小时5)信号稳定且不受显色顺序影响MSD由于基于电化学发光原理,信号分子需在电激发的情况下才能产生信号,因此整个实验流程无需避光,每孔激发与信号采集时长统一,避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异,不受操作人员技术水平差异的影响。本panel可检测以下因子:Akt (Total),Akt (Ser473) 种属:Human,Mouse,Rat。elisa检测试剂盒

LabEx多因子检测技术应用。luminex和抗体芯片

抗体蛋白质芯片技术(Sengenics)优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位,可用于自身抗体结合(90%的抗体表位是非线性的)。与显示低信噪比的其他阵列相比,这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限<10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体,只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内,线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时,0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。luminex和抗体芯片

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