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时间:2022年08月22日 来源:

Q:样本处理方案?A:血清:不含抗凝剂的**管**,室温静置2小时(避免震动,防止溶血),离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存血浆:含抗凝剂(EDTA、肝素,具体采取哪种抗凝剂,参考说明书)的**管**,,离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存细胞裂解液:收集细胞,PBS清洗后,离心10min(1000g,4℃),弃去上清,加入适量裂解液(107细胞对应200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存组织裂解液:适量RIPA裂解液加入组织中(10mg对应100-200ul裂解液),组织破碎器处理组织至匀浆(冰上处理),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存细胞上清:离心,取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技术服务!msd 多因子检测服务

LUMINEX常见问题及解答(一)1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究,生物标记物开发,临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何?灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对,Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的?血清、血浆是常用的样本,每次检测需要10ul,每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测,制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息?检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右,基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性?检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司,产品经过了严格的质量控制。同时,我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。抗体芯片技术服务流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。

MSD超敏电化学发光技术优势:1)更高灵敏度与更宽的线性范围MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log(从亚皮克级到几万皮克),能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。2)样本兼容度高,基质效应小MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小(如粘稠样本,悬浊颗粒样本等),因此对于各类生物学样本的兼容度高。目前测定样本包括但不限于:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物学样本。3)节省样本用量,可实现多重检测传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100uloMSD通过点阵技术,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。4)实验流程简便、快速、多元化MSD提供了更为便捷快速的实验流程,通常只需4-5小时5)信号稳定且不受显色顺序影响MSD由于基于电化学发光原理,信号分子需在电激发的情况下才能产生信号,因此整个实验流程无需避光,每孔激发与信号采集时长统一,避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异,不受操作人员技术水平差异的影响。

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