流式细胞分析仪供应商

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少（25~60μL/孔），检测指标多，可兼容血清/血浆，细胞上清，细胞/组织裂解液，脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高（部分panel可达到亚fg/ml），宽线性范围（达到6个log），具有高重复性（板内CV<6-8%，板间<10%，批间<15%），适宜多类型指标的同时测定（炎症，趋化，代谢……）。本panel可检测以下因子：IFN-γ,IL-1β,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,IL-13,KC/GRO,TNF-α 种属：Rat。流式细胞分析仪供应商

LUMINEX常见问题及解答（二）6)客户自己提供抗体，是否可以进行LUMINEX检测？Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是，需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白，LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测？可以用于基因表达，基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义？表达差异主要取决于标本的性质和数量，我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术，检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大，是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子，而且检测速度较慢，不适合高通量分析。由此可见，两种方法应用方向有很大差别。主要的信号通路本panel可检测以下因子：E-Selectin,ICAM-3,P-Selectin,Thrombomodulin 种属：Human。

抗体蛋白质芯片技术（Sengenics）优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位，可用于自身抗体结合（90%的抗体表位是非线性的）。与显示低信噪比的其他阵列相比，这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限＜10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体，只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内，线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时，0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时，一束激光照射磁珠上的荧光，识别磁珠标记的捕获抗体，从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子，从而实现“定性”作用。进一步，通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体，同步识别磁珠抓取的目标细胞因子，形成“三明治”结构，并加入SA-PE偶联上生物素，通过另一束激光照射进行信号放大检测，实现“定量”作用。本panel可检测以下因子：α-MSH,β-Endorphin,Neurotensin,Oxytocin,Substance P 种属：Rat,Mouse。

液态流式技术(Luminex)流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。基本原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达100个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。本panel可检测以下因子：IL-4,IL-10,IL-13,MDC,TARC 种属：Mouse。炎症 抗体芯片

本panel可检测以下因子：GLP-1 (total),Glucagon,Insulin 种属：Mouse。流式细胞分析仪供应商

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。流式细胞分析仪供应商

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