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时间:2022年09月02日 来源:

LUMINEX常见问题及解答(二)6)客户自己提供抗体,是否可以进行LUMINEX检测?Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是,需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。LabEx MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪。ZPI

液态流式技术(Luminex)流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体,多指标并行分析,可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点;可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。基本原理:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达100个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。CCL 22LabEx提供 AKT、MAPK、Apoptosis等经典信号通路研究。

LabEx提供抗体芯片技术服务,您只需提供保存完好的标本(组织、细胞培养上清、血清、血浆),本公司的芯片技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析,向您提供由您所选的任何一种芯片的实验结果,可以为您节省大量的时间与精力。蛋白芯片技术特点:作为一种快速、灵敏而又经济的工具,蛋白芯片能同时检测单个样品中多种分析物的相对水平。蛋白芯片的使用不需要任何特殊的仪器,也取代了多次免疫沉淀/Westernblot实验。每个芯片在设计时都利用了精心挑选的捕获抗体,它们在硝酸纤维素膜上重复点样两次。经多项研究证实,蛋白芯片能简化鉴定蛋白所需的筛选过程。蛋白芯片高通量定性分析试剂盒比WB的灵敏度高100倍;更有大规模多分子高通量筛选作用,通过监控蛋白水平和一些蛋白翻译后修饰的变化,能迅速靶定目标分子,以便进一步的研究。

LabEx可提供的服务及优势(一)LabEx服务的优势:1、专业的抗体公司;2、先进的实验仪器平台;3、可靠、放心的结果;4、实惠、亲民的价格;5、认真、严谨的工作态度。ELISA:将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。流式检测服务:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置,它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量。并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。抗体芯片:具有微型化、集成化、高通量的特点,可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度,目前主要用于信号转导、蛋白组学、肿块物及其他疾病的相关研究。蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。

MSD超敏电化学发光技术优势:1)更高灵敏度与更宽的线性范围MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log(从亚皮克级到几万皮克),能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。2)样本兼容度高,基质效应小MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小(如粘稠样本,悬浊颗粒样本等),因此对于各类生物学样本的兼容度高。目前测定样本包括但不限于:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物学样本。3)节省样本用量,可实现多重检测传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100uloMSD通过点阵技术,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。4)实验流程简便、快速、多元化MSD提供了更为便捷快速的实验流程,通常只需4-5小时5)信号稳定且不受显色顺序影响MSD由于基于电化学发光原理,信号分子需在电激发的情况下才能产生信号,因此整个实验流程无需避光,每孔激发与信号采集时长统一,避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异,不受操作人员技术水平差异的影响。LabEx提供酶联免疫吸附实验(ELISA)检测服务!C-Reactive Protein

LabEx多因子检测技术应用。ZPI

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些?1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液,怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果?另外,不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是比较好的时间和次数。若不行,还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低;4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。ZPI

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