流式protocol
Luminex：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以**减少生物样品的消耗量，节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。目前，Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子，包括细胞因子、***、自身抗体、**标志物等。本panel可检测以下因子：Adiponectin,sE-Selectin,sICAM-1 种属：Rat。流式protocol
本panel可检测以下因子：BAFF,BCA-1/BLC,BDNF,CD40/TNFRSF5,C-Peptide,Eotaxin,EPO,FGF-21,Ghrelin (active),Ghrelin (total),GLP-1 (active),GLP-1 (inactive),GLP-1 (total),Glucagon,GM-CSF,IFN-α,IFN-β,IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-9,IL-10,IL-12/IL-23p40,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-16,IL-17A,IL-17A/F,IL-17C,IL-17E/IL-25,IL-17F,IL-21,IL-22,IL-23,IL-27p28/IL-30,IL-31,IL-33,Insulin,IP-10,KC/GRO,Leptin,MCP-1,MCP-5/CCL12,MDC,MIP-1α,MIP-1β,MIP-2,MIP-3α,MMP-9 (total),PYY (total),RANTES,TARC,TNF-α,VEGF-A 种属：Mouse蛋白芯片检测鳞状细胞抗原2.8LabEx现有MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式及ELISA等实验室技术平台。
产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？如何解决？1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；4)、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；5)、DAB孵育时间过长或浓度过高；6)、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要；7)、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。
Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时，一束激光照射磁珠上的荧光，识别磁珠标记的捕获抗体，从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子，从而实现“定性”作用。进一步，通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体，同步识别磁珠抓取的目标细胞因子，形成“三明治”结构，并加入SA-PE偶联上生物素，通过另一束激光照射进行信号放大检测，实现“定量”作用。本panel可检测以下因子：SARS-CoV-2 RBD wild type,SARS-CoV-2 S1 wild type 种属：Human。
本panel可检测以下因子：CCL7/MCP-3/MARC,CCL21/6Ckine,CXCL16,IL-15,IL-34,IL-6R alpha,Lipocalin-2/NGAL,MMP-13,MSP/MST1,Myoglobin,Nectin-4,Oncostatin M/OSM,PDGF-DD,Proprotein Convertase 9/PCSK9,RAGE/AGER,RBP4/Retinol-Binding Protein 4,Resistin,L-Selectin/CD62L,Serpin A4/Kallistatin,SHBG,SOST/Sclerostin,SPARC,Stanniocalcin 1/STC-1,Tenascin C,TFF3,Thrombospondin-2,TIM-1/KIM-1/HAVCR,TRACP/***/ACP5,TRANCE/TNFSF11/RANK L 种属：Human本panel可检测因子：C-Peptide,Ghrelin (total),GLP-1 (total),Insulin,Leptin,PYY (total) 种属：Rat。流式细胞分析 fsc h
细胞因子的检测常常被用作各项疾病中预测免疫反应强度的生物标志物。流式protocol
多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。流式protocol
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