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时间:2022年09月30日 来源:

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标,如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多,但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测,同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测,操作繁琐,且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户,传统的技术无法满足需要。日常实验中,常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测,如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析,由于这些因子的含量较少,低于一般常规方法的检测下限,使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少(25~60μL/孔),检测指标多,可兼容血清/血浆,细胞上清,细胞/组织裂解液,脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高(部分panel可达到亚fg/ml),宽线性范围(达到6个log),具有高重复性(板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%),适宜多类型指标的同时测定(炎症,趋化,代谢……)。LabEx多因子检测:luminex平台热销pannel,筛选验证同步进行,省时省力。Kallistatin

Luminex:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达500个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以**减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。目前,Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子,包括细胞因子、***、自身抗体、**标志物等。SCGF抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。

LUMINEX常见问题及解答(二)6)客户自己提供抗体,是否可以进行LUMINEX检测?Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是,需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。

LabEx多因子检测技术--液相悬浮技术经典炎症十因子、高通量细胞因子初筛液相悬浮芯片:高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上,将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。进一步加入生物素标记的高亲和配对二抗结合SA-PE进行信号放大,以实现对多种微量细胞因子的有效检测。利用梯度稀释的标准品检测信号构建标准曲线,实现大量目标样本中多因子的同时检测和准确定量。特点1、既能检测蛋白,又能检测核酸2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平LabEx提供MSD超敏电化学发光平台服务!

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。LabEx 流式平台:BD C6,BD celesta,BD calibur,12色流式检测分析。Pentraxin 3

PCR Array:用于检测生物学功能相关的一系列基因的表达量变化,发现变化比较明显的标志性基因。Kallistatin

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,比较好是4的倍数,否则会造成浪费。Kallistatin

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