流式细胞仪操作步骤

时间:2022年11月29日 来源:

单细胞功能组学(IsoPlexis)LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务,现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台,助推科研进步!产品特点作为蛋白组学全新技术,为了解答免疫应答相关问题,研究人员经常需要制定策略及技术。功能蛋白质组学主要利用分泌蛋白质组在免疫应答启动和调节中的重要作用,并与细胞信号转导建立直接关联。通过测量与免疫应答直接相关的功能性细胞外细胞因子,以实现完整的细胞定义。在看似同质的细胞群体中,总是存在不同程度的细胞异质性。当我们在单细胞水平上研究和表征细胞功能时,尤其如此。一整群细胞的行为通常是由一小群多功能性的细胞亚群驱动的,它可能只占当前所有细胞的20-30%。该技术可通过对每个免疫细胞进行功能性免疫谱分析,实现完全的单细胞功能表征,从而帮助发现更好的生物标记物,加速医治开发。检测罕见的“超级细胞”亚群,以揭示持久性、效力和耐用性等功能性生物学驱动因子。本panel可检测以下因子:Caspase-3,p53,PARP 种属:Human。流式细胞仪操作步骤

本panel可检测以下因子:HMWAdiponectin/Acrp30,ALCAM/CD166,alpha-Fetoprotein/AFP,Angiopoietin-likeProtein4/ANGPTL4,AP RIL/TNFSF13,AtrialNatriureticPeptide/ANP,beta2-Microglobulin,BMP-4,BMP-7,BMP-10,C-Peptide,CA15-3/MUC-1,CalbindinD,CCL14/HCC-1/HCC-3,CCL15/MIP-1delta,CCL24/Eotaxin-2/MPIF-2,Chemerin,ComplementC5a,Cripto,CXCL1/GROalpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRObeta/MIP-2/CINC-3,CXCL4/PF4,CXCL6/GCP-2,ENPP-2/Autotaxin,FABP4/A-FABP,Furin,HB-EGF,IL-3,IL-18/IL-1F4,IL-19,IL-28A/IFN-lambda2,IL-33,Kallikrein3/PSA,M-CSF,MFG-E8,Myeloperoxidase/MPO,NT-3,Periostin/OSF-2,Progranulin/PGRN,Renin,S100A9,SP-D,TFPI,Thrombomodulin/BDCA-3,TRAIL/TNFSF10,VEGF-C种属:Human代谢通路和信号通路本panel可检测以下因子:MMP-1,MMP-3 (total),MMP-9 (active) 种属:Human。

Luminex:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达500个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以**减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。目前,Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子,包括细胞因子、***、自身抗体、**标志物等。

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?A:Serum(血清)、 sma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测?A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。Q:为什么要做预实验?A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗?A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。本panel可检测以下因子:IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,IL-17A,TNF-α 种属:Non-human Primate。

MSD超敏电化学发光技术优势:1)更高灵敏度与更宽的线性范围MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log(从亚皮克级到几万皮克),能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。2)样本兼容度高,基质效应小MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小(如粘稠样本,悬浊颗粒样本等),因此对于各类生物学样本的兼容度高。目前测定样本包括但不限于:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物学样本。3)节省样本用量,可实现多重检测传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100uloMSD通过点阵技术,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。4)实验流程简便、快速、多元化MSD提供了更为便捷快速的实验流程,通常只需4-5小时5)信号稳定且不受显色顺序影响MSD由于基于电化学发光原理,信号分子需在电激发的情况下才能产生信号,因此整个实验流程无需避光,每孔激发与信号采集时长统一,避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异,不受操作人员技术水平差异的影响。样本兼容度高:可兼容血清/血浆、细胞上清、细胞/组织裂解液、脑脊液等多种生物学体液。磁珠分选活化t细胞的原理

Luminex既能检测蛋白,又能检测核酸。流式细胞仪操作步骤

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。流式细胞仪操作步骤

上海乐备实生物技术有限公司目前已成为一家集产品研发、生产、销售相结合的生产型企业。公司成立于2018-04-28,自成立以来一直秉承自我研发与技术引进相结合的科技发展战略。本公司主要从事标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务领域内的标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务等产品的研究开发。拥有一支研发能力强、成果丰硕的技术队伍。公司先后与行业上游与下游企业建立了长期合作的关系。LabEx集中了一批经验丰富的技术及管理专业人才,能为客户提供良好的售前、售中及售后服务,并能根据用户需求,定制产品和配套整体解决方案。上海乐备实生物技术有限公司通过多年的深耕细作,企业已通过医药健康质量体系认证,确保公司各类产品以高技术、高性能、高精密度服务于广大客户。欢迎各界朋友莅临参观、 指导和业务洽谈。

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