深圳PCR辅助工具PCR仪样机

时间:2022年04月07日 来源:

理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。⑤引物3’端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。目前PCR实验室建设要求至少应该分为三个区域,即试剂准备区、核酸制备区和PCR扩增区。深圳PCR辅助工具PCR仪样机

普通PCR仪、梯度PCR仪、原位PCR仪、荧光定量PCR仪的区别及运用。PCR:即合酶链式反应(PolymeraseChainReaction),利用DNA在体外95℃时解旋(变性),55℃时引物与单链按碱基互补配对的原则结合(退火),再调温度至72℃左右,DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5-3)的方向合成互补链(延伸)。PCR仪实际就是一个温控设备,能在95℃,55℃,72℃之间很好地进行温度控制。根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为:普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR,实时荧光定量PCR仪等几类。双槽PCR仪售后随着PCR技术的出现,通过PCR扩增仪可以建立快速、准确的HLA基因分型方法,满足临床移植配型的需要。

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自检:启动仪器后,扩增仪屏幕及指示灯将会点亮,随后几秒钟后会发出“嘟”的一声,屏幕显示“Selftesting……”,仪器开始进行自检。整个自检过程大约需要1分钟;2.进入“FILE”界面:屏幕进入主界面后点击“FILE”进入文件管理界面;3.打开或者创建一个文件夹:点击“OPEN”或“NEW”打开或者创建一个文件夹;4.打开或者创建一个文件:点击“OPEN”或“NEW”打开或者创建一个文件;5.编辑STEP:选中一个STEP点击EDIT后可进行当前STEP的编辑;6.一个典型的PCR程序设置举例及输入技巧介绍:a)95度5分钟:光标停留在TempL处后输入“950”此时系统自动将TempH赋值为“95.0”,并将光标定位至Time处,随后输入“5分钟”,直接键入“0500”,点击OK完成此STEP1的设置。PCR反应条件为温度、时间和循环次数。深圳PCR辅助工具PCR仪样机

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