沙氏葡萄糖琼脂/沙氏琼脂培养基(SDA)
改良Frey氏培养基是一种专门用于支原体培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-改良Frey氏培养基的基础配方包括氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、水解乳蛋白、酚红、硫酸镁、磷酸氢二钠、葡萄糖、酵母浸粉和醋酸铊。每升培养基中具体分量为氯化钠5.0克,氯化钾0.4克,磷酸二氢钾0.2克,水解乳蛋白5.0克,酚红0.1克,硫酸镁0.2克,磷酸氢二钠1.4克,葡萄糖10.0克,酵母浸粉25.0克,醋酸铊0.1克,pH值控制在7.7±0.1。2.**用途**:-主要用于培养滑液支原体及其他禽支原体。特别适合于滑液支原体的培养和检测。3.**pH值**:-改良Frey氏培养基的pH值在7.6~7.8之间,适合支原体的生长。4.**灵敏度和稳定性**:-改良Frey氏液体培养基为澄清、无杂质,呈玫瑰红色的液体;经灵敏度检验,液体培养基灵敏度菌达到10^-8及以上,且阴性对照无变色,证明该培养基灵敏度高。5.**使用方法**:-称取47.4克培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,116℃高压灭菌30分钟,冷至45℃左右时加入100ml无菌马血清、辅酶I0.1g、L-半胱氨酸0.1g、精氨酸0.4g和青霉素80万单位。6.**添加剂**:-可加入改良Frey添加剂,每支添加于1000ml改良Frey氏培养基中,以增强培养效果。SCA培养皿,即标准培养皿(Standard Culture Dish),是一种实验室常用的培养容器。沙氏葡萄糖琼脂/沙氏琼脂培养基(SDA)
培养基
明胶培养基是一种常用的微生物学培养基,主要用于检测和分离细菌,特别是那些能够产生明胶酶(一种能够分解明胶的酶)的细菌。以下是明胶培养基的主要特点:1.**成分组成**:-明胶培养基的主要成分包括明胶、蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、葡萄糖和琼脂。具体配方可能因品牌和实验室而有所不同,但通常包含以下成分:-明胶:作为基质,提供细菌生长所需的营养物质。-蛋白胨:提供氮源和其他营养物质。-牛肉浸粉:提供维生素和氨基酸。-氯化钠:维持渗透压平衡。-葡萄糖:提供碳源。-琼脂:作为凝固剂,使培养基在固态下保持稳定。2.**培养用途**:-明胶培养基主要用于培养和分离能够产生明胶酶的细菌,如某些革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌。它也用于检测细菌的明胶液化能力,这是一种重要的生化特性。3.**pH值**:-明胶培养基的pH值通常在7.2-7.4之间,适合大多数细菌的生长。4.**凝固特性**:-明胶培养基中含有琼脂,使其在冷却后形成固态培养基,便于微生物的分离和观察。5.**明胶液化**:-明胶液化是明胶培养基的一个重要特性。某些细菌能够产生明胶酶,将明胶分解为可溶性肽,导致培养基中的明胶基质液化。这种现象可以通过观察培养基表面的液化圈来判断。缓冲李斯特氏菌增菌肉汤基础(BLEB基础)营养葡萄糖琼脂培养皿的用途十分广,它适用于多种细菌的综合生化试验,可以用于观察菌落形态。
梭杆菌选择性琼脂基础(FusobacteriumSelectiveAgar,FSA)是一种用于梭杆菌选择性分离和培养的培养基。以下是其主要特点:1.**成分**:-梭杆菌选择性琼脂基础的主要成分包括:酪蛋白胨、大豆蛋白胨、组织消化物、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、亚硫酸氢钠、氯化血红素、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、吐温80、二硫苏糖醇和琼脂等。2.**使用说明**:-称取53.2克培养基粉末于1升蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟,灭菌结束后摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固,备用。-冷至55℃,无菌操作,每100毫升培养基中加入35℃预热的脱纤维绵羊血5毫升、万古霉素0.5毫克、交沙霉素0.3毫克、新霉素10毫克,混匀,倾注平板。3.**产品规格**:-通常以250克/瓶的形式提供。4.**储存条件**:-常温,避光,干燥。5.**应用**:-主要用于梭杆菌的选择性分离和培养。梭杆菌选择性琼脂基础通过添加特定的抗生物质和血液,能够有效抑制其他细菌的生长,从而促进梭杆菌的分离和培养。
使用特定染料:亮绿染料可以用于区分细胞生长区域,有助于观察和计数。但需要注意的是,某些染料可能对细胞有毒,因此在添加之前应进行测试。优化培养条件:细胞培养需要特定的温度、湿度、CO2浓度和气体组成,这些条件需要根据所培养的细胞类型进行优化。无菌操作:在接种和培养过程中,必须严格遵守无菌操作规程,以避免污染。观察和分析:在培养过程中,定期观察细胞的生长情况,记录细胞形态、生长速率和集落形成情况。分离和筛选:通过观察细胞在培养皿中的分布和生长情况,可以进行细胞的分离和筛选,挑选出具有特定特性的细胞群体。应用:改良后的亮绿琼脂培养皿可以用于某些类型的细胞培养,如干细胞培养、肿瘤细胞培养等,尤其是在需要三维培养环境的情况下。TBA培养皿中含有胰蛋白胨,这是一种富含氮源的营养物质,能够支持多种细菌的生长。
乳糖亚硫酸盐培养基(LactoseSulfiteMedium,简称LS)是一种用于产气荚膜梭菌确认试验的培养基,具有以下特点:1.**用途**:-主要用于产气荚膜梭菌的确认试验,通过检测其发酵乳糖产酸产气的能力。2.**成分组成**:-培养基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化钠、乳糖和L-半胱氨酸盐酸盐。具体配方为每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化钠2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸盐酸盐0.3g,pH值控制在7.1±0.2(25℃)。3.**添加剂**:-每瓶培养基需配套添加焦亚硫酸钠溶液和柠檬酸铁铵溶液,每8mL乳糖亚硫酸盐培养基(LS)需要1支焦亚硫酸钠和1支柠檬酸铁铵溶液。这些添加剂用于检测硫化氢的产生,使菌落呈黑色。4.**配制方法**:-称取30.3g培养基粉末,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装至含有倒置小导管的试管中,每管8mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却,临用前,每管添加0.5mL过滤除菌的焦亚硫酸钠溶液和0.5mL柠檬酸铁铵溶液。5.**培养条件**:-将培养基放置于36℃±1℃的厌氧环境中培养18-24小时。6.**结果观察**:-接种质控菌株如产气荚膜梭菌(ATCC13124),观察其生长情况和特征。产气荚膜梭菌在该培养基上生长良好,菌落变黑,表明其发酵乳糖产酸产气的能力。胡萝卜浸出液含有多种维生素、矿物质和植物化学成分,这些成分可以为微生物提供必需的营养物质,促进生长。ETSA培养基基础
TBA培养基中添加的胆汁盐是其选择性培养特性的关键因素。胆汁盐对革兰氏阳性细菌具有抑制作用。沙氏葡萄糖琼脂/沙氏琼脂培养基(SDA)
MMA培养皿通常指的是含有改良McBride培养基(ModifiedMcBrideAgar,简称MMA)的培养皿,这是一种用于分离和培养单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes,简称L.monocytogenes)的选择性培养基。成分与原理MMA培养基的主要成分包括:胰蛋白胨:提供氮源和氨基酸。酵母浸粉:提供维生素和生长因子。氯化钠:提供电解质和维持渗透压。磷酸氢二钾:缓冲体系的一部分。硫酸镁:作为某些酶的辅助因子。甘露醇:作为可发酵的碳源。多粘菌素B:抑制革兰氏阴性菌和部分革兰氏阳性菌。萘酚亚甲基蓝:作为指示剂,可检测还原作用。琼脂:作为凝固剂。MMA培养基通过其选择性抑制成分,如多粘菌素B,可以抑制大部分非李斯特菌的生长,而为李斯特菌提供适宜的生长环境。用途MMA培养皿主要用于:食品样本中李斯特菌的分离:在食品工业中,用于检测和监控李斯特菌的污染。环境样本的监测:用于检测加工环境和设备中可能存在的李斯特菌。临床样本的检测:在医院和临床实验室中,用于分离和鉴定李斯特菌。沙氏葡萄糖琼脂/沙氏琼脂培养基(SDA)
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