改良COMBO培养基添加剂B(维生素B12溶液)
在植物组织培养中,除了脯氨酸,还有多种氨基酸和化合物对植物生长和发育具有重要作用:1.**氨基酸**:甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、半胱氨酸等,它们不仅提供有机氮源,还促进植物生长及不定芽、不定胚的分化。2.**维生素**:如盐酸硫胺素(VB1)、盐酸吡哆醇(VB6)、烟酸(VB3)、肌醇等,它们在植物的代谢过程中起催化剂作用。3.**植物生长调节剂**:包括生长素(如IAA、IBA、NAA、2,4-D等)和细胞分裂素(如6-BA、KT、ZT、2-ip等),这些调节剂控制器官发育模式,如根和芽的形成。4.**碳源和能源**:蔗糖是常用的碳源,提供能量,同时在高压灭菌过程中转变为葡萄糖和果糖,有利于细胞生长和分化。5.**无机营养成分**:大量元素(如氮、磷、钾、钙、镁、硫)和微量元素(如铁、硼、锰、铜、钼、钴)对植物的生长发育至关重要。6.**天然有机添加物**:如椰子汁、酵母提取物等,它们可能因品种、产地和成熟度而异,影响实验的重复性。7.**凝固剂**:琼脂是常用的凝固剂,用于配制固体培养基,为植物细胞和组织提供稳定的生长环境。8.**抗氧化剂**:如半胱氨酸、抗坏血酸等,用于防止酚类物质引起的组织褐变。
培养基
甘露醇氯化钠琼脂(MannitolSaltAgar,简称MSA)是一种用于分离和鉴定革兰氏阳性细菌特别是金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的选择性培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-甘露醇氯化钠琼脂的主要成分包括甘露醇、氯化钠、琼脂、酚红指示剂等。具体配方为每升培养基含有甘露醇10克、氯化钠75克、琼脂15克、酚红0.03克,pH值通常调至7.2-7.4。2.**高盐浓度**:-该培养基含有较高浓度的氯化钠(7.5-10%),这种高盐环境有助于抑制革兰氏阴性细菌和一些其他非耐盐细菌的生长,同时促进耐盐的革兰氏阳性细菌如金黄色葡萄球菌的生长。3.**pH值**:-甘露醇氯化钠琼脂的pH值通常在7.2-7.4之间,适合多数细菌的生长。4.**指示剂**:-培养基中添加的酚红指示剂可以显示细菌的代谢活动,帮助鉴别细菌。例如,某些细菌在发酵甘露醇时会产生酸性代谢产物,导致培养基颜色变化。5.**选择性**:-甘露醇氯化钠琼脂具有选择性,特别适合于金黄色葡萄球菌的分离和鉴定。金黄色葡萄球菌能够在高盐环境中生长,并利用甘露醇作为碳源,发酵产生酸,使培养基颜色变化。蛋白胨淀粉酵母培养基YEB培养基特别适用于农杆菌的培养和表达,使用此培养基制备农杆菌感受态细胞,转化效率高。
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。
支原体肉汤培养基是一种专门用于支原体的分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-支原体肉汤培养基的主要成分包括猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。具体配方为每升含有猪胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化钠2.5g,葡萄糖5.0g,酚红0.02g,pH值调至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原体的分离培养,特别是肺炎支原体。支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现,要求使用支原体肉汤培养基培养监测肺炎支原体。3.**培养条件**:-支原体肉汤培养基需要在36℃培养7-14天,观察培养基变色结果。肺炎支原体可以发酵培养基中的葡萄糖,使培养基的pH值降低,遇指示剂酚红使培养基变黄。4.**添加剂**:-每瓶支原体肉汤培养基需配套青霉素溶液(80万IU),每1000ml支原体肉汤培养基溶液中添加1支青霉素溶液(80万IU),以抑制细菌的生长。5.**培养基灵敏度**:-支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基的灵敏度均达到10^9CCU·mL^-1。支原体肉汤基础和精氨酸支原体肉汤基础存放于2~8℃有效期为90天。改良番茄汁琼脂培养皿的质量控制包括对质控菌株的接种和培养,以确保培养基的性能和准确性。
哥伦比亚琼脂培养基(ColumbiaAgar)是一种常用的微生物学培养基,具有以下特点:1.**用途**:-主要用于梭菌的分离培养,特别是用于药品中梭菌的检测。2.**成分组成**:-培养基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化钠和琼脂。这些成分提供碳氮源、维生素和生长因子,维持均衡的渗透压,并作为凝固剂。3.**添加剂**:-每瓶需配套添加硫酸庆大霉素,以抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。4.**pH值**:-培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃)。5.**配制方法**:-称取44g培养基粉末,加热溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃,加入硫酸庆大霉素20mg,混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**培养条件**:-将培养基放置于30℃-35℃恒温培养箱中,进行厌氧培养48-72小时。7.**质控结果**:-接种质控菌株如生孢梭菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,观察其生长情况和特征。生孢梭菌在该培养基上生长良好,形成无色菌落,而大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌则被抑制。8.**注意事项**:-培养基中含少量淀粉,若灭菌前未加热煮沸溶解,灭菌后冷却可能出现少量白色沉淀。
改良CCD琼脂培养皿主要用于空肠弯曲菌的分离培养 。pH值控制在7.2±0.2,为特定的生物提供适宜的生长环境 。改良COMBO培养基添加剂B(维生素B12溶液)
改良察氏肉汤(ModifiedCzapekDoxBroth)是一种常用于培养霉菌的培养基,其特点如下:1.**成分特点**:改良察氏肉汤的主要组成成分包括蔗糖作为的碳源,硝酸钠作为的氮源,以及磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氯化钾、硫酸镁、硫酸亚铁等,这些成分提供必需的离子和缓冲作用。2.**pH值**:改良察氏肉汤的pH值通常控制在6.0-6.5之间,这为霉菌提供了适宜的生长环境。3.**用途**:这种培养基主要用于霉菌的增菌培养,适用于多种菌的培养和传代,包括曲霉、青霉和放线菌等。4.**制备方法**:改良察氏肉汤的制备方法包括称量特定量的粉末,加入蒸馏水溶解,经过高温灭菌,并在冷却后使用。5.**培养条件**:接种后,通常在23℃-28℃下进行需氧培养,培养时间为48至72小时,以观察微生物的生长情况。6.**质控结果**:改良察氏肉汤支持多种质控菌株的生长,例如黑曲霉ATCC16404和白色念珠菌ATCC10231,这些菌株在培养基中表现出良好的生长。7.**应用范围**:除了霉菌培养,改良察氏肉汤还可用于土壤微生物学检验、和霉菌的抗性检验等生物学方法。改良COMBO培养基添加剂B(维生素B12溶液)
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