顶层培养基(Ames试验)
Todd-Hewitt肉汤(THB)是一种专为培养链球菌属细菌设计的培养基,尤其适合于肺炎链球菌和B群链球菌的培养。以下是Todd-Hewitt肉汤的一些关键特点:1.**成分**:Todd-Hewitt肉汤的主要成分包括牛肉浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、碳酸氢钠和磷酸氢二钠。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素和生长因子,同时维持细胞渗透压和培养基的pH值。2.**pH缓冲**:培养基通过碳酸氢钠和磷酸氢二钠进行缓冲,以中和葡萄糖发酵过程中产生的酸性物质,保持适宜的pH环境。3.**应用**:它常用于血清学分型前的链球菌培养,以及制备抗原性链球菌溶血素。此外,它也适用于β-溶血素的制备,特别是用于金黄色葡萄球菌的培养。4.**制备方法**:通常将Todd-Hewitt肉汤的干粉与蒸馏水混合,加热煮沸至完全溶解,调整pH至7.8±0.2,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在使用Todd-Hewitt肉汤时,会进行质量控制以确保培养基支持目标微生物的生长。例如,对于肺炎链球菌和B群链球菌,培养后应观察到良好的生长表现。6.**储存条件**:未开封的Todd-Hewitt肉汤干粉通常在常温下保存,保质期为三年。
培养基
麦氏(Meclary)琼脂是一种用于菌培养的培养基,其特点包括:1.**配方**:包含酵母浸粉、葡萄糖、氯化钾、醋酸钠和琼脂等成分,pH值控制在6.4±0.2(25℃),为菌提供适宜的生长环境。2.**配制方法**:称取28.5克麦氏琼脂培养基干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行115℃高压灭菌30分钟,备用。3.**用途**:适用于菌培养,特别用于某些霉菌和酵母菌的分离和培养。4.**pH值**:pH值对菌的生长至关重要,麦氏琼脂的pH值适应了某些菌对生长环境的酸碱度要求。5.**选择性**:可能具有一定的选择性,有助于特定类型菌的生长,同时抑制或限制其他微生物的生长。6.**应用**:它常用于实验室中菌的分离、鉴定和计数。通过麦氏琼脂培养基进行菌的分离与鉴定通常包括以下步骤:1.**样品收集**:从疑似有菌存在的环境或物体表面采集样本。2.**样品处理**:将采集的样本进行适当的预处理,如稀释、均质化等。3.**接种**:将处理过的样品接种到麦氏琼脂培养基上。4.**培养**:将接种后的培养基放入恒温培养箱中进行培养,一般温度控制在25℃左右。5.**观察**:在培养过程中定期观察,记录菌落的生长情况、形态特征等。营养半固体琼脂(NSA)LB琼脂可以通过将粉末成分溶解在去离子水中,加热煮沸以帮助琼脂溶解,然后用NaOH调节pH至适宜值。
改良R2A琼脂(R2AAgar)是一种低营养培养基,主要用于对处理过的饮用水进行细菌学平板计数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点:1.**成分**:改良R2A琼脂的主要成分包括胰蛋白胨、酵母粉、酸水解酪素、可溶性淀粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、木酮酸钠和琼脂。这些成分提供氮源、维生素、氨基酸、碳源、矿物质,同时木酮酸钠有利于受损细胞的恢复,可溶性淀粉能够吸附有毒的代谢副产物,有利于受损微生物的恢复。2.**pH值**:改良R2A琼脂的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:改良R2A琼脂特别适用于饮用水、纯化水、注射用水中微生物的分离、培养、计数和鉴定。它能够让受损的和耐氯细菌恢复生长,同时又不会被快速生长微生物所掩盖。4.**制备方法**:称取适量培养基,用蒸馏水重悬溶解,推荐115℃灭菌20分钟;也可121℃灭菌15分钟。5.**质量控制**:接种质控菌株,如铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6623、大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538等,放置30-35℃需氧培养48-120小时,以确保培养基的质量符合标准。
改良DG18琼脂基础(DichloranGlycerolAgar,DG18)是一种用于分离和计数霉菌和酵母菌的选择性培养基。它通常用于食品工业中,尤其是在检测干制和半干制食品中的嗜渗霉菌时。这种培养基含有氯硝胺,可以抑制某些霉菌的生长,使得目标菌株更容易被分离和计数。以下是改良DG18琼脂基础的一些特点:1.**配方**:基础配方中含有酪蛋白胨、无水葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯硝胺、氯霉素和琼脂等成分。每升培养基中,酪蛋白胨5.0g,无水葡萄糖10.0g,磷酸二氢钾1.0g,硫酸镁0.5g,氯硝胺0.002g,氯霉素0.1g,琼脂15.0g,pH值为5.6±0.2。2.**检验原理**:该培养基利用氯硝胺抑制霉菌菌落蔓延生长,甘油维持较低的渗透压,适合嗜渗酵母的生长。3.**使用方法**:称取31.6gDG18琼脂基础,加入1升蒸馏水或去离子水,加热搅拌煮沸至完全溶解。加入200g甘油,混匀后,121℃高压灭菌15分钟。4.**质量控制**:酿酒酵母ATCC9763和黑曲霉ATCC16404的生长率(PR)应≥0.7,表现为奶油色菌落和白色菌丝、黑色孢子。枯草芽胞杆菌ATCC6633和大肠埃希氏菌ATCC25922的抑菌性应≤1。5.**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;未开封产品保质期为三年。结晶紫中性红胆盐琼脂是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于水和食品中大肠菌群的平板菌落计数 。
1490Modifiedchoppedmeatmedium(改良碎肉培养基)是一种用于培养多种苛养厌氧菌的微生物培养基,其特点主要包括:1.**成分**:改良碎肉培养基的基础配方包括去脂肪的碎牛肉、蒸馏水和1NNaOH。在滤出液中加入胰酪蛋白胨、酵母提取物、磷酸氢二钾、刃天青(Resazurin)作为pH指示剂。此外,还需加入L-半胱氨酸盐酸盐、氯化血红素(HeminSolution)和维生素K1溶液。2.**pH值**:培养基的pH值通常调节至7.0±0.2(25℃)。3.**厌氧条件**:该培养基需要在80%N2,10%H2和10%CO2的混合气体环境中煮沸并冷却,以确保厌氧菌的生长环境。4.**配制方法**:首先将碎牛肉、水和NaOH混合,煮沸并不断搅动。冷却至室温后撇去表面的脂肪,过滤后留下肉粒和滤出液。向滤出液中加入其他成分,调节pH值,然后在相同的气体环境下分装到含有肉粒的试管中,进行高压灭菌。5.**应用**:改良碎肉培养基特别适用于培养苛养厌氧菌,尤其是梭状芽孢杆菌等。6.**保存条件**:密封,2-25°C保存。7.**注意事项**:避免摄入、呼入和皮肤接触。8.**颜色与澄清度**:深琥珀色略浑浊溶液。这种培养基因其特定的成分和厌氧条件,成为了厌氧菌研究和检测中不可或缺的工具。TSI 培养基可根据细菌的不同反应,有效筛查出具有特殊生化特性的肠道杆菌。Middle Brook 7H10琼脂基础
去氧胆酸钠的存在使得DC培养基对革兰氏阳性菌具有抑制作用,而对大肠菌群等革兰氏阴性菌则相对促进其生长。顶层培养基(Ames试验)
脑心浸萃液态培养基(BrainHeartInfusionBroth,简称BHI)是一种使用的微生物培养基,其特点如下:1.**营养丰富**:BHI培养基含有牛脑浸粉和牛心浸粉,提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子,适合培养各种细菌,包括营养要求较高的微生物。2.**成分**:典型的BHI培养基配方包含胰蛋白胨、牛脑浸出粉、牛心浸出粉、氯化钠、葡萄糖和磷酸氢二钠等成分,这些成分共同维持培养基的渗透压和pH值,确保微生物的良好生长。3.**pH缓冲**:磷酸氢二钠作为pH缓冲剂,帮助维持培养基的pH稳定,通常pH值控制在7.4±0.2(25℃)。4.**应用广**:BHI培养基不仅用于细菌的培养,还适用于霉菌、酵母等其他微生物的培养。它特别适用于矿泉水和城市供水中粪性链球菌滤膜法的确证性实验。5.**制备方法**:将BHI培养基的粉末溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,通常在121℃下高压灭菌15分钟,然后备用。6.**质量控制**:BHI培养基在质控实验中表现出对多种菌株的良好支持,如粪肠球菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌和大肠埃希氏菌等,这些菌株在BHI培养基上能够良好生长并表现出特定的生长特征。顶层培养基(Ames试验)
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