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瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量.有些时候,根据实验需求,还要对血清进行一些特殊的加工。海淀区猪血清订购
猪血清(货号:C2500-0100/0500/1000)猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养,疫苗生产(生产支原体)中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV),用于诱导大鼠肝纤维化,作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。//兔血清(货号:C2520-0100/0500)正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。//羊血清(货号:C2530-0010/0100/0500)用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。//鸡血清(货号:C2550-0100/0500)适用于单抗研制、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。//驴血清(货号:C2540-0010/0100/0500)适用于单抗研制、免疫组化、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。杭州猪血清供应商作用是提供基本营养物质、和各种生长因子、结合蛋白、促接触和生长因子。
放射免疫法以不同稀释度的抗血清与质量标记抗原混合,孵育24h后,测定其结合率。通常以结合率为50%的血清稀度和为效价。如某抗血清的结合率为50%时的稀释度为1:15000,则该血清的效价就是1:15000。抗血清的效价,除由抗血清本身的性质决定外,还受标记抗原的质量、孵育时间,所用稀释液的成分及其pH等因素的影响,在工作中必须引起注意。(2)双向扩散法利用大分子抗原和抗体在琼脂平板上扩散,两者在相交处产生沉淀线,以观察和判断抗血清中是否有抗体及其浓度。球脂板的制备:100mlpH7.1的磷酸盐缓冲液加到15g的琼脂内,于水浴中加温搅拌,使琼脂完全溶解,趁热用纱布过滤,待溶液冷却到65°C左右时,加入叠氮钠(NaN3),使其在溶液中的浓度为0.1%。用移液管把琼脂放在干净平皿或玻片上,约3mm厚,待其冷却,完全凝固后,用打孔器打孔。中间孔内加适量抗原(容量为50ul)周围各孔内分别加入50ul1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀释的抗血清,37°下孵育24h,观察有无沉淀线产生,以判断血清的稀释度。
血清保存方法1.如何保存血清?血清应该在-20℃保存。如果一次无法用完一瓶,应该无菌分装后冷冻保存。注意避免反复冻融。2.为什么储存在冰箱中的血清会出现沉淀?有些胎牛血清产品没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。冻融方法正确解冻方法:将血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小时,使之缓慢部分溶解,然后再放在室温下使之全溶。注意:溶解过程中要每隔一段时间缓慢地摇动血清使之混匀。切记:避免37℃水浴。供应载体蛋白,可联络维生素、脂质、金属离子等。
组份与比例不同胎牛血清和新生牛血清两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、及其他活性物质等组份与比例不同。03用途与用法不同某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,一定不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。至于某一株细胞适应什么样的血清浓度,还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调校。温州新生牛血清批发商
在一些情况下,中和毒性物质维护细胞不受损害。海淀区猪血清订购
用于免疫的动物作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清,用于免疫的动物应适龄,健壮,无感染性疾患,比较好为///雄性,此外还需十分注意动物的饲养,以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔,最好用纯种新西兰兔,一组三只,兔的体重以2~3kg为宜。二、免疫途径免疫途径有多种多样,如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等,一般常用皮下或背部多点皮内注射,每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如、酶、等生物学活性抗原,一般不宜采用静脉注射。海淀区猪血清订购
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