山东化学试剂级TRIS使用注意事项

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在生物制剂研发及生产过程中常会用到缓冲液，其作用是在有限的范围内调整溶液的pH值，使溶液的酸碱度符合制剂成分适宜的范围。**常用的缓冲液有很多，如磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、氨基酸缓冲液等。不同的缓冲液差别液很大，***主要来对比两种**常用的缓冲液：Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液各自的优缺点。一、Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液优缺点对比1、Tris-HCl缓冲液Tris缓冲液是在生化研究及制剂生产中使用较***的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，如Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。①Tris-HCl缓冲液优点碱性较强，可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液；对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。②Tris-HCl缓冲液缺点pH受浓度影响较大，稀释10倍，pH变化大于0.1。温度效应大，如4℃时pH=8.4，37℃时pH=7.4。浙江化学试剂级TRIS批量药用级TRIS-HCl应用。

【检查】   pH10.0~11.510.0~11.510.0~11.5溶液的澄清度与颜色溶液应澄清，几乎无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓。供试品溶液应澄清，且无色。--氯化物≦0.01%≦10ppm--有关物质照薄层色谱法试验，供试品溶液（1)如显杂质斑点，其颜色与对照溶液所显的主斑点比较，不得更深。照薄层色谱法试验，供试品溶液（a)如显杂质斑点，其颜色与对照溶液（b）所显的主斑点比较，不得更深。（≤1.0%）--干燥失重≦0.6%≦0.5%≦1.0%硫酸灰分--≦0.1%--炽灼残渣≦0.1%--≦0.1%铁盐≦0.001%≦10ppm--镍盐≦0.0015%----重金属≦10ppm----细菌内***供注射用：<0.03EU/mg<0.03EU/mg，若拟用于生产肠外制剂，而无需进一步的适当工艺去除细菌内***。--【含量测定】按干燥品计算，含C4H11NO3不得少于99.0%。按干燥品计算，含C4H11NO399.0%~100.5%。按干燥品计算，含C4H11NO399.0%~101.0%。【类别】药用辅料，酸碱平衡调节剂----【贮藏】遮光，密封保存。--密封保存。【杂质】--三(羟甲基)硝基甲烷--

Tris衍生缓冲液除了Tris-HCl之外，Tris还有多种衍生缓冲液：TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl，常用于清洗免疫染色的组织或WesternBlotting中的蛋白印迹膜等；TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，做WesternBlotting中常用的一种洗膜缓冲液；TE=Tris-HCl+EDTA，对DNA的碱基有保护性，常被用于DNA的稳定和储存；TAE=Trisbase+乙酸+EDTA，是大片段DNA短时间电泳时***使用的缓冲系统；TBE=Trisbase+硼酸+EDTA，适用于长时间DNA电泳，对较小片段分离效果较好。了解更多氨丁三醇相关资讯，敬请关注上海艾伟拓！

①Moderna**核酸疫苗（mRNA-1273，pH7.0-8.0）将SM-102、DSPC、胆固醇以及PEG脂质与溶于pH5.0乙酸盐缓冲液中的mRNA以2.5：1（脂质：mRNA）的比例混合，再将混合物用Tris-HCl（pH=7.5）中和，加入蔗糖作为冷冻保护剂，***将制备得到的溶液进行无菌过滤，-70℃下冷冻保存准备进一步使用。***：②恩利（注射用依那西普，Enbrel）Enbrel是全球***个全人源的肿瘤坏死因子拮抗剂，是全球****的药物之一。辅料：甘露醇，蔗糖，氨丁三醇（Tris）2、HEPES缓冲液的应用HEPES缓冲液对细胞无毒性作用，它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用时浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。在体外诊断、DNA/RNA提取、脂质体药物等方面均有应用。①Onivyde®-伊立替康脂质体是一种拓扑异构酶抑制剂，与氟尿嘧啶和甲酰四氢叶酸组合，用于***基于吉西他滨***后疾病进展的胰腺转移性腺*患者，为晚期大肠*的**用药，也可用于术后的辅助化疗；对肺*、乳腺*、胰腺*等也有一定疗效。***：Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液都是生物制剂中常用的缓冲液，如何选择需要结合制剂本身的特性和***优化的需求综合考量。药用级TRIS-HCl已登记。浙江cas号77-86-1TRIS市场价格

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酸碱缓冲溶液是指能够抵抗外加少量强酸、强碱以及水的稀释作用，并维持溶液pH值基本不变的溶液。常见的缓冲溶液需具备酸碱缓冲对，缓冲对可以是两种不同的物质，如HAc-NaAc缓冲溶液中的HAc和NaAc，也可以是一种物质里同时含有互为共轭酸碱的不同基团，如邻苯二甲酸氢钾中的羧基（-COOH）和羧酸根（-COO-）。当然，浓度很大的强酸、强碱溶液中即使不含有酸碱缓冲对也有一定的缓冲能力，因为外加少量的酸或碱对强酸、强碱的浓度变化影响很小，所以pH值基本不变。缓冲溶液的作用原理是通过互为酸碱缓冲对之间的酸碱平衡移动来抵御外加少量酸、碱以及稀释作用的。缓冲溶液自身pH值可根据公式进行计算，缓冲溶液的缓冲能力可以用缓冲容量进行标度。但是，任何缓冲溶液的缓冲能力都是有限的，因为当大量的H+或OH-进入溶液时，缓冲溶液中的缓冲对将被大量消耗，抗碱、抗酸的作用也随之减弱直到消失。山东化学试剂级TRIS使用注意事项