江苏哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒

时间:2024年01月24日 来源:

可通过CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(发光法)进行细胞群落中DNA合成测定(BrdUbased)。优点是:实验结果同增殖细胞数目紧密相关,可一步完成细胞的温和固定和变性,操作方便稳定,不破坏细胞形态。5-Bromo-2´-dULabeling/DetectionKitI(荧光法)或KitII(AP)可使用试剂盒提供的BrdU单抗,以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。上海东寰告诉您使用EdU细胞增殖检测试剂盒的便捷性。江苏哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒

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细胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU检测方法是新的细胞增殖检测方法。细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、等一切真核生物中的一种普遍的分裂方式,是真核细胞增殖的主要方式。减数分裂是生殖细胞形成时的一种特殊的有丝分裂湖南哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒优势上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒发挥的重要作用。

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BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗体,由于空间位阻,双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。法使用小分子标记的叠氮化物(Azide),无需DNA变性,操作更便捷,兼容性好,检测结果更加稳定可靠。本试剂盒检测快速。相对于BrdU法,本试剂盒采用BeyoClick™EdU法检测新合成的DNA,所需时间缩短。经本试剂盒处理后,增殖的细胞呈棕色,可以用普通光学显微镜进行观察。HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果参见图3。图3.HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到棕色染色(左侧一列);EdU(10μM)孵育2小时组有明显的棕色染色(中间一列);而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后,棕色染色减弱,说明DNA合成被抑制后,EdU的掺入被抑制(右侧一列)。

该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU细胞增殖检测试剂盒的发展前景如何呢?

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本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应,不会影响细胞形态,不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测,也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等),这种变性可能会影响细胞形态,影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较参见图2。EdU细胞增殖检测试剂盒厂家。上海品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司

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Jurkat细胞只用EdU标记(左列),或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列),2小时后染色,然后通过流式细胞仪进行检测。从流式结果图中可以看出,EdU标记的细胞有较高比例的绿色荧光阳性细胞,呈现绿色荧光阴性(弱染色)和阳性(强染色)的两个峰,分别对应于未增殖细胞和增殖细胞。经过Hydroxyurea处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,剩下一个绿色荧光阴性的峰。Hela细胞只用EdU标记(左列),或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列),2小时后染色(步骤染Hoechst,方便观察增殖细胞比例),然后通过荧光显微镜进行检测。镜下可见,*EdU标记的细胞有一部分染上绿色荧光的增殖细胞,未增殖细胞的细胞核呈蓝色单染。江苏哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒

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