湖南如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒厂家

EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)，其反应原理参见图1。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记，从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU，在铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，终使细胞DNA标记上生物素等探针EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用？湖南如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒厂家

细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU细胞增殖检测方法通过检测渗入DNA复制期间的EdU，借助荧光检测工具即可准确地检测出新增殖的细胞，快速统计处于S期的细胞百分数，分析细胞增殖情况。该方法简单、灵敏、快速、准确，适合各种细胞系的细胞增殖检测，尤其适用于高通量筛选试验，如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。上海品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好上海东寰告诉您什么是EdU细胞增殖检测试剂盒？

该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。

羟基脲(Hydroxyurea)为DNA合成抑制剂，经过10mM羟基脲提0min处理的细胞，绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失，因此常被用作EdU实验的阴性对照。配制好的Click-iTAdditiveSolution请根据每次用量适当分装后-20℃保存，避免反复冻融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物质析出为正常现象，请上下颠倒几次，待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色，则说明有效成分降解，不能再使用。皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液，以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时，维持白细胞的光散射特性。本试剂盒做动物实验时可能需要更多的EdU，请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。EdU细胞增殖检测试剂盒的原理是什么？上海东寰告诉您。

细胞增殖虽然与多种因素有关，比如细胞代谢活性、与细胞增殖相关的蛋白表达、ATP的浓度等等，但是检测细胞增殖现象的直接准确的方法就是用荧光探针直接检测遗传物质DNA的合成，这种方法是研究细胞增殖、信号通路、DNA修复及分化等等方向常用的方法。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比，EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒如何去使用呢？品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒厂家

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EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，更适合结合其他染料或蛋白标记（如P65抗体）等进行多重标记，从而在细胞水平获取更多的直观多维特征信息，更适合深入开展细胞功能方面的研究。该方法无需DNA变性，无需抗原修复，无需抗原抗体反应，简单、灵敏、快速、准确，适合各种细胞系的细胞增殖检测，尤其适用于各种细胞系的高通量筛选实验，如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。湖南如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒厂家