无锡酒精肝疾病动物模型建模
pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特异性组织或细胞中。其中pirb-cwt小鼠表达cre,但不含有loxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表达cre并分别含有一个或者两个loxp-pirb等位基因。其中f3代杂交小鼠纯合子/杂合子鉴定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp组织特异性的基因敲入也可以通过加入另一对引物,用pcr来验证:pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意:如果dna的样本不够纯,或者pcr的延伸时间不够长,可能扩增不出来1180bp的产物。cre阳性pcr鉴定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安医学院pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。大鼠疾病建模请找上海东寰。无锡酒精肝疾病动物模型建模
1、动物模型名称:皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤,致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准:a.皮肤大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐**素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑;致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清;致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解无锡酒精肝疾病动物模型建模模型应适用于多数研究者使用,容易复制,实验中便于操作和采集各种标本。
是从侧面展示的压迫元件插入椎间孔的结构示意图。图3是术后大鼠四肢表现情况。图4是术后28天大鼠的双下肢缩足阈值变化曲线图。图5是重复经颅磁刺激对大鼠背根神经压迫模型的影响。具体实施方式以下通过具体的实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明,而不是限制本发明的范围。实施例1、模型的制备1、腹腔注射1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮肤,俯卧位固定于动物手术台上,铺无菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左侧作一2-3cm纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌至横突上方,暴露腰4椎间孔,腰5椎间孔(椎旁肌可用自制拉钩保持分离状态)。3、将2根***端11为4mm,第二端12为2mm,直径为,第二端12置于腰4椎间孔及腰5椎间孔外。如图1和2所示,可以看到腰4锥体1、腰5锥体2、腰6锥体3、l型棒10、腰4神经根4和腰5神经根5的位置关系。当l型棒10的***端11插入腰4锥体1的腰4椎间孔后,会对腰4神经根4起到压迫作用;同样的,当l型棒10的***端11插入腰5锥体2的腰5椎间孔后,会对腰5神经根5起到压迫作用。从而达到模拟腰椎间盘突出压迫神经根的目的,制备得到大鼠慢性背根神经压迫模型~
目前鉴定出15个外显子,外显子1起始密码为atg,外显子15的终止密码子是tga(转录本:)。pirb蛋白属于i型跨膜糖蛋白,包含由六个免疫球蛋白样结构域(domain,d)组成(d1-d6)的胞外段,一个疏水的跨膜段,三个免疫受体酪氨酸依赖的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一个itims样序列组成的胞内段。理论上讲,pirb的分子量约为92kd,但是western-blot分析中,pirb经常位于105kd处,因为pirb是糖蛋白。以往研究发现,pirb在免疫系统和中枢调节中均发挥重要作用。在免疫系统中,pirb在许多造血细胞都有表达,包括b细胞、肥大细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突细胞,但是在胸腺细胞、成熟的t细胞和自然杀伤细胞不表达。疾病动物模型建模好做吗?
球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型,实验动物种属:新西兰兔,实验动物环境:SPF级1、实验方法:用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,经右股浅动脉,将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm,球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出,反复3次。球囊拉伤手术后,动物喂以高脂饲料,连续9周,每天给料两次,自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准:腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来。无锡酒精肝疾病动物模型建模
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PMID:15082495、7561688)①HE染色②关节侧视图③PCR鉴定、二、糖尿病相关动物模型1.糖尿病***1)模型构建(PMID:30826357)使用链佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同时与ApoE-/-小鼠采用高脂喂养18周2)模型检测指标(PMID:29107826、28345659)3)生化指标检测4)超声检测5)主动脉染色检测2.糖尿病心肌病1)诱发性DCM模型模型构建(PMID:29732743)实验动物:大鼠方法:各大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1,pH,现配现用),并给予高脂饲料进行喂养。①模型检测指标血糖检测②HE染色③超声心电图2)自发性1型DCM模型3)自发性2型DCM模型3.糖尿病视网膜病变1)模型构建PMID:30862093实验动物:小鼠方法:糖尿病雄性db/db(+/+Leprdb/J)小鼠。喂养至21周2)模型检测指标①胶质原纤维酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR组视网膜组织内核层及外核层结构松散,细胞排列紊乱GCL,神经节细胞层;INL,内核层;ONL,外核层三、动物模型构建总结1.临床资料合理性在纳入临床资料时,需关注特定疾病患者的流行病学趋势,即疾病易发年龄,男女比例等,同时需考虑是否与体重、基因表达等具有相关性。2.模型合理性选择合适,简便。无锡酒精肝疾病动物模型建模
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