河南ELISA试剂盒哪家便宜
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。ELISA试剂盒中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。河南ELISA试剂盒哪家便宜
Elisa试剂盒技术原理:(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。(2). 结合在固相载体表面a的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。云南ELISA试剂盒采购ELISA试剂盒通过反应而结合在固相载体上。
ELISA试剂盒不论何种载体,在运用前均可进行挑选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,ELISA试剂盒时刻及其蛋白量也有一定影响,一般多选用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它实验条件相一起,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1~10μg/ml。
由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性。ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条。
ELISA试剂盒在实验开始之前,请将ELISA试剂盒拿出来放在室温中过半个小时。ELISA试剂盒的步骤:1、取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。2、阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl;样品孔样本1:100稀释后加100μl;空白对照孔不加。3、混匀,置37℃温浴30分钟。4、扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置60秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。5、每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。6、置37℃温浴30分钟。7、洗涤,同第5步。8、每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。9、每孔加终止液50μl,混匀,置酶标仪450nm处测各孔A值(建议用双波长450nm、630nm)。ELISA试剂盒需经扩散才能到达反响的结尾。浙江ELISA试剂盒批发
ELISA试剂盒在测定时,受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。河南ELISA试剂盒哪家便宜
ELISA试剂盒如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 标本较多时,请分批操作。可能原因:孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底; 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。解决办法: 贴封片或加盖;按说明步骤严格控制操作时间。洗板ELISA试剂盒可能原因:采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。河南ELISA试剂盒哪家便宜
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