重庆重点项目指南 外泌体载药

为考察装载药物的外泌体DATS-Exo在体内抑制中流转移的情况,将肺转移小鼠黑色素瘤中流细胞通过尾静脉注射入C57BL/6小鼠体内,建立实验性肺转移小鼠模型并通过腹腔注射给予DATS-Exo及DATS。结果显示,造模后,H&E染色发现模型组小鼠与正常组相比,肺部发生了严重的转移,体现在模型组小鼠肺部出现了较多的中流结节数目和较大的中流体积。不论是DATS组还是含药外泌体DATS-Exo组均表现出一定的抑制中流转移的效果,而与DATS组相比,装载了DATS药物的外泌体载药系统能更好地抑制中流的肺转移,减少中流结节数目,降低异常的肺重量,具有更优的抗中流转移作用。MHS来源外泌体装载连翘苷（phil）对外泌体的特异蛋白（CD63,Alix）的表达无影响。重庆重点项目指南 外泌体载药

有研究发现，在外泌体载药系统中，对外泌体的产生环境进行干扰(如，缺氧)能够改变外泌体的分泌组分。Zhu等人研究了缺氧处理的间充质干细胞（MSCs）来源外泌体(ExoH)在心肌修复方面是否优于其在常氧条件下产生的外泌体(ExoN)。在小鼠心肌梗死实验中，ExoH处理的小鼠具有更高的生存率、更小的疤和更好的心脏功能恢复。进一步研究发现，相比于ExoN，ExoH具有更高表达水平的miＲ-210以及对外泌体分泌至关重要的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)的表达。类似地，Zhu等人发现缺氧条件下MSC-Exo递送的miＲ125b-5p能够通过改善心肌细胞凋亡来促进缺血性心脏修复。此外，他们还将ExoH与缺血心肌靶向肽缀合，构建了一种新型的药物递送载体，增强了缺血性疾病的药物递送特异性。海南外泌体载药原理口服递送装载紫杉醇(PAC)的外泌体作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生长明显受到抑制。

外泌体由于在细胞通讯的过程中可以携带基因，引起了基因zhiliao研究者的广fan关注。外泌体作为基因载体与传统的病毒或非病毒载体相比，其优势在于:(1)从患者体内获取的外泌体，经载入基因后，再注入患者体内几乎不会引起免疫反应，更加安全;(2)外泌体体积很小，可以逃过网状内皮系统的捕捉，有效保护承载的基因;(3)承载基因的外泌体可以通过与目标细胞膜融合的方式，将基因类药物释放到细胞质中。而其他非病毒载体一般被受体细胞內吞后才能将基因类药物输送至细胞中的内涵体。内涵体内pH值约为5～7.2，易将基因类药物酸化、破坏，并且也有部分药物无法从内含体中逃脱出，因而，相比之下，可以进行膜融合的外泌体运载的基因类药物的转染效率更高。

外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。外泌体载带药物常用的电穿孔方法，通过将外泌体、药物和电穿孔缓冲液共孵育，然后在一定条件下行电脉冲处理，后用微型挤出机挤出而实现外泌体载药。该方法成功将大分子卟啉装载入乳腺ai细胞分泌的外泌体中；有研究表明外泌体成功载带RNA药物miR一26a可用于肝aizhiliao。该方法是否可实现外泌体载带蛋白质类药物有待进一步研究。该方法可能存在破坏蛋白质的结构、影响蛋白质的活性和蛋白质装载率低等缺点，从而限制其应用。外泌体载药药物载入方式多种多样，包括被动方式和主动方式两类。

miＲNA的运载也存在着种种挑战:miＲNA体内稳定性差、生物分布不理想、易被体内酶降解以及容易引起副反应等。越来越多的研究表明外泌体也是体内运载miＲNA的优良载体，并且利用外泌体运输miＲNA的zhiliao方法已经在许多疾病模型中得以应用。采用转染间充质干细胞的方法，使外泌体载有anti-miＲ-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miＲ-9传递的实验时，发现两种细胞不jin可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miＲ-9。且anti-miＲ-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miＲ-9实现，而非经GJIC传递的anti-miＲ-9，显示出外泌体在运载miＲNA进行基因zhiliao时的潜力。外泌体作为药物载体可以载带多种蛋白质，实现靶向给药和稳定酶活性等目的。江苏外泌体载药大概费用

装载连翘苷（phil）的MHS来源外泌体对A549细胞迁移能力有较为明显的抑制作用。重庆重点项目指南 外泌体载药

外泌体载yao方法已在多种研究中得到应用，但各自有一定的局限性：共孵育依赖药物跨膜运输而包载；超声法和电穿孔法较为常用，但都破坏了外泌体的膜结构而使药物进入外泌体，与参数有较大关系；挤压法依赖仪器的机械力，但机械力是否对外泌体产生影响未知；反复冻融法载药能力较差；对外泌体修饰可以达到提高细胞摄取或者靶向而改善药物的疗效；药物混合物中加入皂苷会有体内溶血的潜在风险。目前研究者应用较多的方法是共孵育结合超声、超声、电穿孔、修饰外泌体。重庆重点项目指南 外泌体载药

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