福建外泌体载药的方法

外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。外泌体作为细胞-细胞间交流的“运载工句”，外泌体在正常及疾病下都发挥着不可忽视的功能。利用抗ai症药物进行中流zhiliao是抑制中流的一个重要方法，目前抗ai症药物的运载存在着种种挑战，主要体现在:(1)抗ai症药物的疏水性;(2)抗ai症药物的毒性以及非靶向性;(3)易被人体qing除，体内循环的半衰期很短等。采用外泌体运输抗ai症药物，可以提高药物体系的水溶性，降低药物对人体的毒性以及避免被网状内皮系统捕捉从而延长其循环时间。外泌体有良好的生物相容性、高生物渗透性、低免疫原性、低毒性，可作为药物载体。福建外泌体载药的方法

外泌体来源于机体细胞，可作为天然的生物载体，能进行长距离的细胞间物质输运和信号传递。这种细胞间的通讯在机体的生理和病理过程中至关重要，已被用于多种疾病和中流的zhiliao与组织损伤修复等疾病的研究。主要方法分为 2种：一是某些特殊细胞分泌的外泌体包含有zhiliao作用的有效分子，可将外泌体作为生物药物应用于免疫抑制和活化、血管生成以及组织损伤修复等；另一则是利用工程化改造后的外泌体作为药物载 体将zhiliao药物运送至zhiliao部位。河北动物组织样本外泌体载药实验参考价格间充质干细胞外泌体能递送14-3-3ζ预防顺铂造成的肾毒性损伤，具有修复肾损伤的作用。

外泌体携带的特殊miRNA可参与神经的保护与形成。XIN发现，间充质干细胞源性的外泌体通过静脉注射注入中风模型鼠中，可以促进脑部缺血区域血管和神经的再生。外泌体携带的miRNA除用于脑中风疾病的zhiliao外，还可用于脑部其他神经疾病的zhiliao。肌萎缩性侧索硬化症是一种进行性、致死性的运动神经元疾病，氧化损伤是肌萎缩性侧索硬化症（ALS）的主要损伤机制之一。Bonafede等人发现，脂肪源性基质细胞分泌的外泌体能有效地减少ALS体外模型细胞的氧化损伤，明显提高细胞的存活率。但这种保护效果并不是呈剂量依赖性的关系，当外泌体的浓度为0.2 ug/ml时句有jia的保护效果，然而当外泌体的浓度提高到0.4 ug/ml时，这种保护效果却降低了，这可能与外泌体中复杂的成分相关。Pusic等人用低水平的IFNy（γ干扰素）刺激DC细胞，将其产生的外泌体（IFNy-DC-EXOs）通过鼻腔给药到大鼠体内，研究结果显示给予IFNy-DC-EXOs的大鼠组其大脑皮质区域鞘磷脂水平是PBS对照组的1.5倍。这类研究显示出外泌体在多发性硬化症和脱髓鞘病中的zhiliao潜力。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——梯度密度离心法。外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间,因此,可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合,原理是先除去非囊泡物质,再通过梯度密度浓缩提取外泌体,该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分离出某些确切囊泡,因此,该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足,污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层,特别是这个密度范围又比较宽。树突细胞分泌的外泌体表面会表达出CD9，有利于加强外泌体与靶细胞的融合，提高外泌体对药物运输的效率。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子，已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取，此方法实行起来较为简单。外泌体载带miR一26a、miR一200b等可用于抗中流、糖尿病性创伤、肠纤维化的zhiliao。吉林组织样本外泌体载药参考价

将药物载入外泌体的方法主要有两种：前转载和后转载。福建外泌体载药的方法

miＲNA的运载也存在着种种挑战:miＲNA体内稳定性差、生物分布不理想、易被体内酶降解以及容易引起副反应等。越来越多的研究表明外泌体也是体内运载miＲNA的优良载体，并且利用外泌体运输miＲNA的zhiliao方法已经在许多疾病模型中得以应用。采用转染间充质干细胞的方法，使外泌体载有anti-miＲ-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miＲ-9传递的实验时，发现两种细胞不jin可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miＲ-9。且anti-miＲ-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miＲ-9实现，而非经GJIC传递的anti-miＲ-9，显示出外泌体在运载miＲNA进行基因zhiliao时的潜力。福建外泌体载药的方法

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