黑龙江海洋生物外泌体

各种细胞粘着分子在外泌体膜表面表达，由其决定外泌体被运输往哪一种细胞，期望开发利用该特征的新型DDS。外泌体在体液中十分稳定，同时外囊泡所含的蛋白质和RNA被外泌体的脂质双层膜所包被也不会分解。另外在从体液中提取外泌体后，体液可长期稳定保存，因此外泌体有望成为临床检测的新型疾病生物标记。外泌体与各种疾病的相关性被检测出，特别是血液中释放的病细胞来源的外泌体，其与正常细胞来源外泌体在结构分子上的差异倍受瞩目，并作为症状早期诊断技术，应用于与症状进展相关的研究。甚至人们期望将尿液中的外泌体作为肾脏、前列腺疾病、膀胱疾病的新型诊断标记，髓液中的外泌体作为脑内种瘤和神经退行性疾病的新型标记物。结果表明，PS亲和法可以检测到许多目前为止都无法检测的外泌体蛋白质和RNA。黑龙江海洋生物外泌体

外泌体即细胞分泌的直径约40-100 nm的微小膜泡，多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。一开始被当做细胞排泄物，但是近几年，研究发现外泌体可谓是小身体大作用。种瘤发生转移后，如何靶向呈递药物一直是种瘤医治中的一个巨大挑战。发表于Nano Lett的一项研究中，研究人员利用外泌体制备药物的递送系统（LD-MDS），并取得成功。在这项研究中，研究人员将相关药物锚定在活巨噬细胞膜上，细胞自身相关蛋白酶响应开启并将药物转载进入外泌体，顺利递送至肺转移灶并且转化为纳米囊泡和次级纳米囊泡，促进转移性4T1病细胞的有效内化和细胞死亡。之后，受损的4T1病细胞可以释放次级纳米囊泡和游离药物分子，再破坏邻近的病细胞。研究显示， LD-MDS对体内直径小于100μm的肺转移病灶显示出优异的靶向效率，并显着压制肺转移。黑龙江海洋生物外泌体外泌体作为细胞间信号传导的通讯工具和作为病等各种疾病的生物标记话题比较热门。

l 纳米颗粒追随分析法：简称NTA，该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快，检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。l Western blot分子标志物检测：外泌体标志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；细胞质蛋白，如肌动蛋白（Actin）和钙磷脂结合蛋白（Annexins）；参与生物功能的分子，如凋亡转接基因2互作蛋白X（ALIX）、种瘤易感基因101蛋白（TSG101）、热休克蛋白（HSP70、HSP90），以及细胞分泌的特异性蛋白。外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质和核酸，可以运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等进入受体细胞，参与细胞间通讯。不同细胞来源的外泌体所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作为多种疾病的早期诊断标记物，也能作为靶向药物的载体进行疾病医治。

在种瘤微环境中，种瘤细胞来源的外泌体能够诱导CD4+T分化为调节性T细胞，压制机体的抗种瘤免疫反应；肺病细胞分泌的外泌体含有miR-21和miR-29a，可在免疫细胞中结合并开启TLR8，使TLR介导的NF-κB信号通路活化，从而导致种瘤的生长和转移。在肺病的侵袭和转移过程中，细胞间通讯扮演着重要的角色。据有关报道称，NSCLC分泌的外泌体内TGFβ和IL10的高表达与肺病的转移密切相关。此外，开启的T细胞可以通过调控Fas信号通路增加基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达，进而促进肺病的转移。这些机制有望成为肺病医治的潜在靶点。虽然大多数外泌体都是促进种瘤的侵袭与转移，但也有报道称，外泌体miR-302b可以通过压制TGFβRⅡ来压制肺病细胞的转移与增殖。外泌体其纯度与超离心法和PEG沉淀法提取外泌体做比较。

外泌体中这些物质的结构与它们在分泌细胞内的结构不同，所以可能存在一种外泌体特异蛋白和mRNA/miRNA在外泌体内选择性积累的机制。这种特异性可将外泌体内的RNA作为生物标记，更进一步作为医治开发方法的靶点。外泌体中的mRNA一旦被靶细胞吞噬，能够引起这个细胞内的功能性蛋白的表达，但外泌体中多数的miRNA是前体而非功能性miRNA，这些miRNA起着何种生理性意义，学者们正在研究。由于外泌体含有各种蛋白质、RNA和脂质，研究人员正将其进行细胞分类，建立数据库（ExoCarta）。此外，在世界各地分别进行着运用蛋白质组学、转录组学和系统生物学的大规模分析工作，而FunRich的EV plugin作为一种通用的分析手段已被公布出来。今后，在推进外泌体研究方面，各领域的研究人员信息共享至关重要。外泌体作为膜和细胞溶质蛋白、脂质和RNA细胞之间传递的载体。黑龙江海洋生物外泌体

外泌体分析会引起何种生理作用，这是进一步研究的发展方向。黑龙江海洋生物外泌体

建立记录各论文实验条件的数据库也可作为规避混乱的方法之一。一方面，随着EV研究倍受世界瞩目，各国启动了大型研究项目。美国启动NIH战略性大型项目（Extracellular RNA Communication），国际厉害性学会——Gordon和Keystone Symposia也从2016开始成立会议小组。受到欧洲药物研究开发公司“创新药物倡议组织（IMI）”的支持推进的CANCER-ID项目，也包含EV研究在内。2017年日本选定了EV研究为文部科学省研究开发战略的目标之一，期待会加速今后的研究发展。无论如何，今后EV研究的根本就是必须有强有力的研究方法和技术，而PS亲和法有望成为其中之一。黑龙江海洋生物外泌体