天津铁死亡与外泌体载药
外泌体携带的特殊miRNA可参与神经的保护与形成。XIN发现,间充质干细胞源性的外泌体通过静脉注射注入中风模型鼠中,可以促进脑部缺血区域血管和神经的再生。外泌体携带的miRNA除用于脑中风疾病的zhiliao外,还可用于脑部其他神经疾病的zhiliao。肌萎缩性侧索硬化症是一种进行性、致死性的运动神经元疾病,氧化损伤是肌萎缩性侧索硬化症(ALS)的主要损伤机制之一。Bonafede等人发现,脂肪源性基质细胞分泌的外泌体能有效地减少ALS体外模型细胞的氧化损伤,明显提高细胞的存活率。但这种保护效果并不是呈剂量依赖性的关系,当外泌体的浓度为0.2 ug/ml时句有jia的保护效果,然而当外泌体的浓度提高到0.4 ug/ml时,这种保护效果却降低了,这可能与外泌体中复杂的成分相关。Pusic等人用低水平的IFNy(γ干扰素)刺激DC细胞,将其产生的外泌体(IFNy-DC-EXOs)通过鼻腔给药到大鼠体内,研究结果显示给予IFNy-DC-EXOs的大鼠组其大脑皮质区域鞘磷脂水平是PBS对照组的1.5倍。这类研究显示出外泌体在多发性硬化症和脱髓鞘病中的zhiliao潜力。母乳外泌体改造后的载药体,不仅拥有外泌体本身的独特优点,还兼具改造后功能。天津铁死亡与外泌体载药
外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。外泌体作为细胞-细胞间交流的“运载工句”,外泌体在正常及疾病下都发挥着不可忽视的功能。梓醇是地黄中主要的环烯醚萜类化合物, 句有抗氧化、抗凋亡和促神经营养因子生成等作用, 并句有保护神经细胞的功能。将负载梓醇的外泌体 (C-Exos) 与人神经母细胞瘤 (SH-SY5Y) 细胞共培养24 h, 与模型组及空白外泌体组相比, SH-SY5Y神经细胞存活率上升了17%, 由此证明梓醇能通过外泌体途径将有效的成分运送至神经细胞当中, 并起到神经保护的作用。浙江组织外泌体载药价格比较药物载入到外泌体中的方式可分为两种,即外源性载yao方式和内源性载yao方式。
细胞外囊泡(EVs)因其生物相容性、大小适宜、体循环中保存时间长和低免疫原性等优势,在生物医学应用中得到了普遍的应用。研究发现EV比普通的细胞膜囊泡更有优势。EV的优势在于,由于其表面的跨膜蛋白(如MHC复合物)数量减少,它们的免疫原性低于其宿主细胞膜,具体的多少取决于它们的细胞来源。凋亡小体、微泡和外泌体是根据EV的生物成因进行分类的。当胞内体的膜向内萌发形成外泌体时,就产生多泡体(MVB)。当MVBs与质膜融合时,外泌体被释放到细胞外空间。一旦从细胞表面释放出来,外泌体能够与细胞外基质相互作用,或在微环境内外引发反应。将RNA和蛋白质引入外泌体,并将其定向到身体特定区域的方法仍在开发中。外泌体被认为是一种合适的药物传递系统,因为蛋白质和遗传物质都可以装载到其中。
外泌体作为一种潜在的理想型药物递送载体,可以利用化学和基因工程等方法对其进行内部及膜表面工程化改造,将化学药物、功能短肽、小干扰RNA等多种生物活性物质包载到外泌体中,可实现特定类型的细胞或组织的靶向药物递送。目前,常用的实现外泌体包载药物方法有膜融合法、电穿孔法及基因工程法等。膜融合法-利用外泌体句有磷脂双分子层膜结构这一特性,可使用共孵育、聚碳酸酯膜挤压等外源性方法使外泌体与其他类型膜结构或药物融合。电穿孔法-也叫电转染,是一种新型外泌体包载核酸药物的生物技术。基因工程法-外泌体的基因修饰是将目的基因转入供体细胞,使外泌体膜上功能配体过表达的一种可行策略。过氧化氢酶载入外泌体后在炎症大脑中的生物分布情况可以利用C57BL/6雌性小鼠来研究验证。
间充质干细胞(MSC)的外泌体成为有潜力的天然药物递送载体的优势:与其他来源外泌体的产生机制一致,即首先由细胞质膜内陷形成内体,然后内体向内出芽形成多泡体,而多泡体具有两种命运,一种是移动到细胞表面与质膜融合,以胞吐的方式将外泌体释放到细胞外;另一种是与溶酶体结合,将内容物降解。MSC-Exo具有外泌体的共同特征,即富含四跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,整合素,主要组织相容性复合物Ⅰ、Ⅱ,热休克蛋白,多泡体合成相关蛋白(ALIX、TSG101),核酸,胆固醇、磷酸甘油酯、鞘磷脂等。此外,MSC-Exo还具有特异性标志物,例如,CD29、CD90、CD73和CD44等。MSC-Exo具有与MSCs相似的生物学功能,而且避免了细胞移植的风险,易于获取、储存和管理;可控性高、免疫原性低、安全性好。电穿孔是常见的外泌体载药手段,其原理是通过瞬时电流在外泌体膜上产生孔洞以允许药物渗入其中。天津动物血液样本外泌体载药参考价
利用成纤维细胞样干细胞来源的外泌体装载靶向KRAS的siRNA,可以抑制胰腺ai的生长。天津铁死亡与外泌体载药
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——梯度密度离心法。外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间,因此,可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合,原理是先除去非囊泡物质,再通过梯度密度浓缩提取外泌体,该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分离出某些确切囊泡,因此,该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足,污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层,特别是这个密度范围又比较宽。天津铁死亡与外泌体载药
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